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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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南海所老龚

新虫 (正式写手)

[求助] TA克隆之疑问

各位大虾好!

同时做了2个不同的TA克隆,实验手段与材料均一致,唯一不同的是目的片段且目的片段长度差不多,结果一个克隆成功另一平板什么都没有。

问题:为什么另一个平板什么都没有了?如果是连接不上的话应该也有蓝斑显示啊?求详解,不胜感激。
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TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好!

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 继续加油啊 2011-05-02 12:27:18
南海所老龚(金币+1): 2011-05-02 15:50:43
重新做一遍。
第二,加A了吗?


其实做一遍不见得就说明问题,在试试呢,如果在处问题,可能要仔细找了。
我觉得问题不大~
最好的年龄是,那一天,终于知道并且坚信自己有多好,不是虚张,不是夸浮,不是众人捧,是内心明明澈澈知道:是的,我就是这么好。
2楼2011-05-02 11:28:21
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南海所老龚

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by beibei9535 at 2011-05-02 11:28:21:
重新做一遍。
第二,加A了吗?


其实做一遍不见得就说明问题,在试试呢,如果在处问题,可能要仔细找了。
我觉得问题不大~

PCR产物含有A末端
TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
3楼2011-05-02 12:31:17
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


1949stone(金币+1): 好西瓜 2011-05-02 14:25:26
引用回帖:
Originally posted by 南海所老龚 at 2011-05-02 10:37:23:
各位大虾好!

同时做了2个不同的TA克隆,实验手段与材料均一致,唯一不同的是目的片段且目的片段长度差不多,结果一个克隆成功另一平板什么都没有。

问题:为什么另一个平板什么都没有了?如果是连接不上的 ...

光凭这些信息还是不好判断呢,方便的话最好说得详细些哦
4楼2011-05-02 12:56:57
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

实验不仅仅是理论和技术,还要有人品和运气
5楼2011-05-02 18:05:57
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yoyoyoyo3985

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励分享经验 2011-05-03 18:00:13
做了两个月的Ta克隆,有时候长斑,有时候不长,蓝白斑筛选不到蓝斑。到最后才从80个斑里筛到了一个阳性克隆,实验的偶然性还是很大的,不妨重做一遍。
难免埋怨时间的手,把相爱写成相爱过
6楼2011-05-03 13:35:23
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nuoyaeva

铁杆木虫 (正式写手)

....做过1周的T克隆..。大概挑过300个克隆,测序用,我的实验中用于突变验证。
蓝白都有,白多蓝少,感觉如果试剂+细菌的质量过关,不会出现什么问题。

生活是美好的
7楼2011-05-03 15:37:44
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amilie030312

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不长斑的原因很多的啦,不能这样一句带过,而且分子生物学本身就是个看似简单但非常复杂的问题,一步一步找原因吧。
8楼2011-05-03 16:19:35
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫

引用回帖:
Originally posted by yoyoyoyo3985 at 2011-05-03 13:35:23:
做了两个月的Ta克隆,有时候长斑,有时候不长,蓝白斑筛选不到蓝斑。到最后才从80个斑里筛到了一个阳性克隆,实验的偶然性还是很大的,不妨重做一遍。

你真有耐心呀……估计你的T载体质量不行。
仕不可不弘毅,任重而道远
9楼2011-05-03 18:57:04
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yoyoyoyo3985

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 墨香若水 at 2011-05-03 18:57:04:
你真有耐心呀……估计你的T载体质量不行。

一直没找到原因出在哪里,只能是优化条件啊……
做的痛苦
难免埋怨时间的手,把相爱写成相爱过
10楼2011-05-04 22:24:07
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