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petrel932562铜虫 (小有名气)
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真核质粒扩增
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| 这方面的完全新人一个，想问下让公司构建好真核表达载体后，我要自己扩增质粒，那放在大肠杆菌里扩增可以么？大肠杆菌不是原核生物门么？要是不可以的话，我该怎么扩增？急求~望大虫们能帮助下！ |
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2楼2012-10-27 11:10:57
petrel932562
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3楼2012-10-27 23:02:31
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4楼2012-10-28 04:16:20
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【答案】应助回帖
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你说表达两种外源基因是什么意思？是两个基因来源于不同物种，想一起表达在一个真核细胞里，还是说你想用不同的启动子分别表达？ |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
petrel9325625楼2012-10-29 00:57:44
petrel932562
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6楼2012-10-29 23:28:22
cicelyzh
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【答案】应助回帖
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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-30 15:50:03
petrel932562: 金币+10, ★★★很有帮助, 这个质粒有ColE1 ori，f1 ori，SV40 ori。。。算齐全了么？是不是有真核和原核的2中启动子就可以实现我期望的同一个质粒在真核细胞里表达在原核细胞里克隆扩增啦？2个多克隆位点是在ColE1 ori和f1 ori（SV40 ori 紧接于f1 ori之后）的，方向是从ColE1 ori开始的。麻烦啦 2012-10-30 22:22:31
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-30 15:50:03
petrel932562: 金币+10, ★★★很有帮助, 这个质粒有ColE1 ori，f1 ori，SV40 ori。。。算齐全了么？是不是有真核和原核的2中启动子就可以实现我期望的同一个质粒在真核细胞里表达在原核细胞里克隆扩增啦？2个多克隆位点是在ColE1 ori和f1 ori（SV40 ori 紧接于f1 ori之后）的，方向是从ColE1 ori开始的。麻烦啦 2012-10-30 22:22:31
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这个质粒我没用过。你查一下它是否含有细菌的复制起点。如果是真核表达穿梭质粒，应该有两个ori，一个是在真核宿主里复制用的，一个是在原核宿主里复制用的。 |
7楼2012-10-30 08:28:36
cicelyzh
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8楼2012-10-31 07:25:37
