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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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petrel932562

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 真核质粒扩增

这方面的完全新人一个，想问下让公司构建好真核表达载体后，我要自己扩增质粒，那放在大肠杆菌里扩增可以么？大肠杆菌不是原核生物门么？要是不可以的话，我该怎么扩增？急求~望大虫们能帮助下！
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1楼 2012-10-26 23:53:20
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cicelyzh

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-28 04:16:20
直接弄个穿梭质粒不就好了，既可以用真核的表达体系，又可以在大肠杆菌里扩增。

你说表达两种外源基因是什么意思？是两个基因来源于不同物种，想一起表达在一个真核细胞里，还是说你想用不同的启动子分别表达？
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petrel932562
5楼2012-10-29 00:57:44
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diandong

专家顾问
本帖内容被屏蔽
2楼2012-10-27 11:10:57
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petrel932562

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by diandong at 2012-10-27 11:10:57
将真核上的片段酶切下来，换成原核的克隆载体或表达载体。

就是直接拿回来放在大肠杆菌里扩增不可以的啊？那就是还是要自己用原核的克隆载体导入到大肠杆菌里扩增好，酶切这个扩增了的质粒和真核表达载体，在把我要的这段基因和真核表达连接么？？？然后再去测序鉴定下？
要是我把拿回来的真核表达载体放到真菌里，是不是就是会表达多而克隆少？
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3楼2012-10-27 23:02:31
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cicelyzh

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
petrel932562: 金币+5, ★★★很有帮助, 可不可以在追问下有没有表达可以表达2种外源基因的穿梭质粒 2012-10-28 17:59:12
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-10-29 15:46:58
直接弄个穿梭质粒不就好了，既可以用真核的表达体系，又可以在大肠杆菌里扩增。
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4楼2012-10-28 04:16:20
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