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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 能给蛋白加什么标记，来判断蛋白是否表达？
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

[交流] 能给蛋白加什么标记，来判断蛋白是否表达？

我的蛋白胞外表达出来总是N端的80个氨基酸被截断，给蛋白加个什么标记，来判断蛋白是否表达？
我能想到的有2种，
1：在特定位置加个放射性标记，这样通过相应的设备，可以直观的看到该区域是否表达
2：在特定位置加个荧光标记，通过荧光显微镜来分析蛋白是否表达。但是荧光蛋白分子量太大可能是个问题，另外，把荧光蛋白加在序列中间，如果表达也会有荧光吗
还有没有其他方法能检测蛋白的一段区域是否表达，请大家给点建议。
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1楼 2012-10-20 17:00:41
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水寒冰006

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-10-21 08:00:22
你是在细胞里面表达还是在原核里面表达？可以再两端加tag，然后用tag的抗体去检测，两端加tag的质粒有很多，你可以查查。
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2楼2012-10-20 17:41:43
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jia1012428

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 水寒冰006 at 2012-10-20 17:41:43
你是在细胞里面表达还是在原核里面表达？可以再两端加tag，然后用tag的抗体去检测，两端加tag的质粒有很多，你可以查查。

这个我知道，我的课题比较复杂，这招行不通。
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3楼2012-10-20 22:57:08
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guoxingliu

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看天: 金币+2, 鼓励 常来 2012-10-25 19:05:43
在要表达的目的蛋白前面融合绿色荧光蛋白，是可以的。
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4楼2012-10-21 09:03:09
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jia1012428

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by guoxingliu at 2012-10-21 09:03:09
在要表达的目的蛋白前面融合绿色荧光蛋白，是可以的。

我现在就在加绿色荧光蛋白，但荧光蛋白都比较大，200多个氨基酸，好大啊。
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5楼2012-10-25 16:25:23
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guoxingliu

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看天: 金币+2, 鼓励 常来 2012-10-25 19:06:16
融合表达，还好，我们实验室有人做过融合甘露聚糖酶基因，结果比较理想，甘露聚糖酶基因和绿色荧光蛋白差不多的大，作为一种建议，仅供参考。
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6楼2012-10-25 17:20:48
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