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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒双酶切。。。。。。。
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xulu2008

金虫 (正式写手)

[求助] 质粒双酶切。。。。。。。

大家对质粒（不含目的基因）双酶切一般用多少体系，酶的体积为多少，一般会考虑到酶浓度吗？我们实验室有人告诉我可以不考虑酶浓度，用10体系时酶各加0.5微升，dna加5微升（约200ng/5微升），这样可以吗？
另外电泳时酶切样品上样多少呢，5微升可以吗？跑出的条带有些暗，是不是可以增加上样量
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1楼 2012-10-20 12:35:19
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tulip1213

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶切鉴定，20微升就够了，上样量也是20.质粒。载体酶切的话，看你的回收方法，以及质粒的拷贝数决定酶切体系。各种载体不一样的。我20,40,60微升体系都用过。
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3楼2012-10-20 19:22:18
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