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xulu2008

金虫 (正式写手)

[求助] 质粒双酶切。。。。。。。

大家对质粒(不含目的基因)双酶切一般用多少体系,酶的体积为多少,一般会考虑到酶浓度吗?我们实验室有人告诉我可以不考虑酶浓度,用10体系时酶各加0.5微升,dna加5微升(约200ng/5微升),这样可以吗?
另外电泳时酶切样品上样多少呢,5微升可以吗?跑出的条带有些暗,是不是可以增加上样量
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水寒冰006

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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xulu2008: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-10-21 10:17:59
如果只是看酶切效果的话,你上面的条件可以,条带不亮没关系,能够看到,拍照就行,不过你酶切的是10ul剩下的也没有用,可以都上样跑电泳。
2楼2012-10-20 17:49:37
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