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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助-4Kb的基因P不出来
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昺昺

木虫 (小有名气)

[求助] 求助-4Kb的基因P不出来

有一个4Kb的基因，我需要把它P出来然后够载体，用cDNA二链为模板，混合酶、rTaq、LA Taq、pfu等酶都试过了，退火温度也做过梯度，还有，分成两段进行拼接的方法也用过，都是P不出来。请各位大虾指点一二，不甚感激！！

[ Last edited by 1949stone on 2012-10-23 at 07:50 ]
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太阳出来，星星要走。
1楼 2012-10-18 09:38:26
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银虫 (著名写手)
会不会是引物问题？
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11楼2012-10-18 17:03:58
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银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
32楼: Originally posted by ilyzp at 2012-10-23 15:45:13
也有可能是酶的原因，可以试试东洋纺的KOD酶，你可以上网看看它的主页，主页上有对这个酶的例子的介绍都有，有很长的片段都可以P出来，我们实验室用的很长的片段都很好，你也可以试试

就这个酶了   很容易扩出来的！但是后面得加A  再连接哦
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37楼2012-11-02 16:43:34
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