[求助] 富含脯氨酸的蛋白质为什么在进行SDS-PAGE的时候，分子量会比本来的分子量大很多？已有1人参与

RT，求高人解释，SDS-PAGE不是本来剔除了电荷的影响么。
另外，到底什么样的算脯氨酸“富集”？

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1楼 2012-10-09 09:52:36

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2008430117

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小丹木木: 金币+3, 鼓励交流问题 2012-11-09 14:29:43

1.有可能不是富含脯氨酸的原因
2.上面提到是纯化的蛋白，有没有可能这种蛋白含有较多的半胱氨酸，有可能出现3.的情况
3.在跑大分子构象复杂的蛋白质分子时，常会出现在泳道顶端（有时在浓缩胶中）的一些大分子未知条带或加样孔底部有沉淀，主要由于还原剂在加热的过程中被氧化而失去活性，致使原来被解离的蛋白质分子重新折叠结合和亚基重新缔合，聚合成大分子，其分子量要比目标条带大，有时不能进入分离胶。但它却于目标条带有相同的免疫学活性，在WB反应中可见其能与目标条带对应的抗体作用。　
4.　处理办法：在加热煮沸后，再添加适量的DTT或Beta巯基乙醇，以补充不足的还原剂；或可加适量EDTA来阻止还原剂的氧化。
我也是新手，希望对你有帮助。。。。

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7楼2012-11-08 19:17:07