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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr产物胶回收浓度低，能不能和T载体连接
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weining1203

新虫 (小有名气)

[求助] pcr产物胶回收浓度低，能不能和T载体连接

小弟最近做基因克隆，目的片段2200bp，pcr产物条带亮度和2000的marker差不多，pcr体系为50ul，全部用来胶回收，回收后浓度太低，只有16ng/ul
,不知道能不能和T载体连接？ T载体为 pMD-18T  simple Vector。求大神指点
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1楼 2012-09-30 21:40:23
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jw1985629

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要看亮度，对比着marker来看，基本上不弱于marker就可以，跟它一样亮貌似就知道包含多少核酸量了，具体数我忘记了
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i still have so much to do
10楼2012-10-01 23:13:33
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以将你的回收产物浓缩一下！
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

weining1203
持之以恒、永不放弃！
2楼2012-09-30 21:52:48
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weining1203

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-09-30 21:52:48
你可以将你的回收产物浓缩一下！

怎样浓缩谢谢
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3楼2012-09-30 21:56:55
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wzqno

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-01 20:09:49
引用回帖:
3楼: Originally posted by weining1203 at 2012-09-30 21:56:55
怎样浓缩谢谢...

多PCR几管，可以四五个泳道的用一个回收柱回收，而且溶胶液至少通过回收柱两次，最后洗脱的时候40℃预热一下，也洗脱两次，浓度应该会高些
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-30 23:20:50
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