24小时热门版块排行榜    

查看: 1038  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

草鹿八千留

银虫 (初入文坛)

[求助] 求高人指导!蛋白浓度不够怎么办?

小妹我纯化了一个约18kD的蛋白,准备用NMR解结构,浓度要求达到0.3mM才行,表达量还可以,但是在纯化中试了ph分别为8.0和6.8的buffer,溶解性均不太好,关键是浓缩以后只能到0.1mM就开始沉淀了,纠结啊纠结~~不知各位大侠能不能给点宝贵建议?谢谢了!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

once1015

木虫 (正式写手)

★ ★
看天: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-27 22:51:17
另外需要 用DLS 看一下是否聚集,如果聚集了  你浓度高也不行吧
4楼2012-09-27 14:46:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

once1015

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天: 金币+2, 鼓励回答 2012-09-27 22:50:58
如果不是用于复合物的结构, 可以适当提高盐的浓度。
2楼2012-09-27 14:43:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天: 金币+3, 鼓励回答 2012-09-27 22:51:06
浓缩出现沉淀,主要还是因为PH不合适的缘故,介意根据蛋白的PI值多试几个PH梯度。同时浓缩的时候,最好补点盐,盐浓度一般要补到0.5M~1M。稍微加一点甘油,保护蛋白,不让浓缩条件太恶劣。
3楼2012-09-27 14:46:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草鹿八千留

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gelois at 2012-09-27 14:46:08
浓缩出现沉淀,主要还是因为PH不合适的缘故,介意根据蛋白的PI值多试几个PH梯度。同时浓缩的时候,最好补点盐,盐浓度一般要补到0.5M~1M。稍微加一点甘油,保护蛋白,不让浓缩条件太恶劣。

可是我这个要作为NMR采集谱的样品,盐浓度太高的话NMR探头会承受不了,最多承受200mM的盐浓度
5楼2012-09-27 15:17:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 315分求调剂 +4 26考研上岸版26 2026-03-26 4/200 2026-03-26 10:20 by king123!
[考研] 289求调剂 +15 硕星赴 2026-03-23 15/750 2026-03-26 02:16 by BruceLiu320
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 08工学调剂 +13 用户573181 2026-03-20 18/900 2026-03-25 22:00 by zbssa
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 材料277求调剂 +4 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 15:29 by fch1983
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
信息提示
请填处理意见