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如何知道表达的蛋白是几聚体
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如何知道表达的蛋白是几聚体
我用大肠杆菌表达了一个蛋白,在真核中为四聚体,我现在想知道此蛋白在原核表达是几聚体,如何鉴定?之前跑过native-page因没有参照,只能确定它不是单体。
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2012-09-19 11:26:40
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2012-09-20 08:36:49
SDS-PAGE可以知道单体的大小,Native-Page或分子筛可以知道天然状态分子量,二者结合即可知道聚合度
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2楼
2012-09-19 17:11:47
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2楼
:
Originally posted by
littlestove
at 2012-09-19 17:11:47
SDS-PAGE可以知道单体的大小,Native-Page或分子筛可以知道天然状态分子量,二者结合即可知道聚合度
请详细说一下怎么通过native page 知道天然分子量啊~
聚合度有什么关系呢?
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3楼
2012-09-19 20:03:54
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native-page显示的就是天然分子量啊,蛋白质是活性状态,分子克隆书上有native梯度胶配制方法。用native分子量除以SDS-PAGE获得的单体分子量,就知道是几聚体
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2012-09-20 10:07:38
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native-page显示的就是天然分子量啊,蛋白质是活性状态,分子克隆书上有native梯度胶配制方法。用native分子量除以SDS-PAGE获得的单体分子量,就知道是几聚体
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5楼
2012-09-20 10:10:04
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5楼
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littlestove
at 2012-09-20 10:10:04
native-page显示的就是天然分子量啊,蛋白质是活性状态,分子克隆书上有native梯度胶配制方法。用native分子量除以SDS-PAGE获得的单体分子量,就知道是几聚体
那native-page是以什么为参照确定它的分子量?不同蛋白等电点不同,等电点对蛋白的迁移也有影响啊,因此用什么作为native-page的参照呢。SDS-page有marker。
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6楼
2012-09-20 11:54:46
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LZ可以去打个MS,就能知道现在的蛋白分子量,以及到底是几聚体了。
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2012-09-21 13:30:03
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