24小时热门版块排行榜    

查看: 2520  |  回复: 20
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sjjsy7

银虫 (小有名气)

[求助] 原核表达载体构建老不成功,求助!

本人构水稻基因的原核表达载体(PET-28a),胶回收后老是连不成功,以前也没再意就成功了,但这次老不行;现在想请教一下各位虫友你们在构载体时体系是怎么样的,我的是目的片段:载体=6:1.5  1ul T4酶 1ul buffer 0.5u水。TAKARA的ligation kit 也用过,也不行。希望大家给点意见!!!
           下面是我回收后的电泳图,是8ul上样!

图片1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

尚慕寒

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这图上哪个是载体哪个是片段?怎么有3个大小不同的条带?而且都太淡了!
高山仰止,景行行止,虽不能至,心向往之。
4楼2012-09-17 20:55:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
sjjsy7: 金币+1 2012-09-17 22:17:26
我20微升的体系加 buffer2微升,楼主可以看看连接酶的说明书

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
有时候,一句话,可以改变未来
2楼2012-09-17 12:54:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sjjsy7: 金币+2, 有帮助 2012-09-17 22:17:01
检没检测过片段里是否有突变位点?
未来不是梦
3楼2012-09-17 15:16:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sjjsy7

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 尚慕寒 at 2012-09-17 20:55:55
你这图上哪个是载体哪个是片段?怎么有3个大小不同的条带?而且都太淡了!

最后两个是载体,前一个是没有切过的对照,是啊,浓度确实很低!!
5楼2012-09-17 22:16:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 123/6150 2026-08-19 23:44 by stan_et
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +13 kkkl_v 2026-08-19 13/650 2026-08-19 22:37 by 宝贝虫子
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +12 基诺咪客 2026-08-17 16/800 2026-08-19 22:04 by kk 的小木虫
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见