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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 急求：聚丙烯酰胺电泳点样孔之间相互串样
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nuliwo

铁虫 (初入文坛)

[求助] 急求：聚丙烯酰胺电泳点样孔之间相互串样

如图所示，点样到一孔后，然后出现从梳齿底部流入另一孔内，导致相互串样，大家实验中是否遇到，急盼大家的帮助！

1.png

[ Last edited by nuliwo on 2012-9-16 at 22:20 ]
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1楼 2012-09-16 17:15:26
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yunbfly

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-09-17 13:58:20
是玻璃板不平造成的，玻璃板用久了就变形。有几个解决方案：
1 及其严重的侧漏，换全新的玻璃板，两块都换
2 比较严重的，制胶前先搭配玻璃板，用梳子先过一下点样槽，感觉一下点样口的宽度的变化，如果比较一致就可以用了，后续工作要严格将两块板子按这个搭配组装。
3 对于不是很严重的侧漏，点样前将梳子涂点凡士林。同时，用文件夹将梳子夹在玻璃板上，防止点样时移动。
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5楼2012-09-17 08:50:38
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普通回帖

ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
浓缩胶再怎么配也不会这样吧，但也不排除浓缩胶没有配好的原因；另外，个人更倾向于配胶玻璃板没有夹紧，楼主把配胶板对称夹紧后再试试，看看效果
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有时候，一句话，可以改变未来
2楼2012-09-16 23:01:56
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nuliwo

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-16 23:01:56
浓缩胶再怎么配也不会这样吧，但也不排除浓缩胶没有配好的原因；另外，个人更倾向于配胶玻璃板没有夹紧，楼主把配胶板对称夹紧后再试试，看看效果

谢谢指点，已经上了多个夹子，但还是不行，此外，我跑的是分子标记不是蛋白！梳子和玻璃都换了，依然不行啊！
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3楼2012-09-16 23:06:25
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nuliwo

铁虫 (初入文坛)
兄弟们帮帮忙，做了好几年都没问题，最近真不顺啊，快毕业了，着急。。。
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4楼2012-09-16 23:08:29
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-17 13:58:29
1.浓缩胶彻底凝没，按楼主说所做好几年了，这个应该会注意吧？
2.另外分离胶配好后，上面是不是加水作为凝固对照了或者用消泡剂消泡了，是不是凝固后没用滤纸吸干净？
sds-page我做的比较少，些许拙见，不对处望见谅.
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
6楼2012-09-17 08:50:55
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶混匀，加入过后插上梳子后等胶完全凝固过后才拔梳子！
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低调稳重务实内敛---------------残
7楼2012-09-17 09:07:13
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nuliwo

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yunbfly at 2012-09-17 08:50:38
是玻璃板不平造成的，玻璃板用久了就变形。有几个解决方案：
1 及其严重的侧漏，换全新的玻璃板，两块都换
2 比较严重的，制胶前先搭配玻璃板，用梳子先过一下点样槽，感觉一下点样口的宽度的变化，如果比较一致就 ...

多谢兄弟指点，玻璃板已换过，梳子也换了，还是依然如此！痛苦。。。。
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8楼2012-09-17 12:08:12
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nuliwo

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wu_shiyong at 2012-09-17 09:07:13
胶混匀，加入过后插上梳子后等胶完全凝固过后才拔梳子！

兄弟，您的TEMED和APS一般加多少？
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9楼2012-09-17 12:08:50
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nuliwo

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Marado at 2012-09-17 08:50:55
1.浓缩胶彻底凝没，按楼主说所做好几年了，这个应该会注意吧？
2.另外分离胶配好后，上面是不是加水作为凝固对照了或者用消泡剂消泡了，是不是凝固后没用滤纸吸干净？
sds-page我做的比较少，些许拙见，不对处望见 ...

我没做SDS-PAGE，只是普通的变性胶啊
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10楼2012-09-17 12:09:22
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