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nuliwo

铁虫 (初入文坛)

[求助] 急求:聚丙烯酰胺电泳点样孔之间相互串样

如图所示,点样到一孔后,然后出现从梳齿底部流入另一孔内,导致相互串样,大家实验中是否遇到,急盼大家的帮助!

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[ Last edited by nuliwo on 2012-9-16 at 22:20 ]
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yunbfly

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-09-17 13:58:20
是玻璃板不平造成的,玻璃板用久了就变形。有几个解决方案:
1 及其严重的侧漏,换全新的玻璃板,两块都换
2 比较严重的,制胶前先搭配玻璃板,用梳子先过一下点样槽,感觉一下点样口的宽度的变化,如果比较一致就可以用了,后续工作要严格将两块板子按这个搭配组装。
3 对于不是很严重的侧漏,点样前将梳子涂点凡士林。同时,用文件夹将梳子夹在玻璃板上,防止点样时移动。
5楼2012-09-17 08:50:38
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普通回帖

ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
浓缩胶再怎么配也不会这样吧,但也不排除浓缩胶没有配好的原因;另外,个人更倾向于配胶玻璃板没有夹紧,楼主把配胶板对称夹紧后再试试,看看效果
有时候,一句话,可以改变未来
2楼2012-09-16 23:01:56
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nuliwo

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-16 23:01:56
浓缩胶再怎么配也不会这样吧,但也不排除浓缩胶没有配好的原因;另外,个人更倾向于配胶玻璃板没有夹紧,楼主把配胶板对称夹紧后再试试,看看效果

谢谢指点,已经上了多个夹子,但还是不行,此外,我跑的是分子标记不是蛋白!梳子和玻璃都换了,依然不行啊!
3楼2012-09-16 23:06:25
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nuliwo

铁虫 (初入文坛)

兄弟们帮帮忙,做了好几年都没问题,最近真不顺啊,快毕业了,着急。。。
4楼2012-09-16 23:08:29
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-17 13:58:29
1.浓缩胶彻底凝没,按楼主说所做好几年了,这个应该会注意吧?
2.另外分离胶配好后,上面是不是加水作为凝固对照了或者用消泡剂消泡了,是不是凝固后没用滤纸吸干净?
sds-page我做的比较少,些许拙见,不对处望见谅.
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
6楼2012-09-17 08:50:55
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
胶混匀,加入过后插上梳子后等胶完全凝固过后才拔梳子!
低调稳重务实内敛---------------残
7楼2012-09-17 09:07:13
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nuliwo

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yunbfly at 2012-09-17 08:50:38
是玻璃板不平造成的,玻璃板用久了就变形。有几个解决方案:
1 及其严重的侧漏,换全新的玻璃板,两块都换
2 比较严重的,制胶前先搭配玻璃板,用梳子先过一下点样槽,感觉一下点样口的宽度的变化,如果比较一致就 ...

多谢兄弟指点,玻璃板已换过,梳子也换了,还是依然如此!痛苦。。。。
8楼2012-09-17 12:08:12
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nuliwo

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wu_shiyong at 2012-09-17 09:07:13
胶混匀,加入过后插上梳子后等胶完全凝固过后才拔梳子!

兄弟,您的TEMED和APS一般加多少?
9楼2012-09-17 12:08:50
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nuliwo

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Marado at 2012-09-17 08:50:55
1.浓缩胶彻底凝没,按楼主说所做好几年了,这个应该会注意吧?
2.另外分离胶配好后,上面是不是加水作为凝固对照了或者用消泡剂消泡了,是不是凝固后没用滤纸吸干净?
sds-page我做的比较少,些许拙见,不对处望见 ...

我没做SDS-PAGE,只是普通的变性胶啊
10楼2012-09-17 12:09:22
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