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跑SDS-PAGE电泳时出现问题,求助!谢谢
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蒲公英嘟嘟
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跑SDS-PAGE电泳时出现问题,求助!谢谢
最近在做SDS-PAGE电泳时总是出现胶的下半部分跑的不好,模糊,还有点收缩的样子,Marker下面的条带也不好,求助请各位前辈,谢谢
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2012-09-12 21:01:14
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5楼
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Originally posted by
ybs007
at 2012-09-13 16:29:41
你可以再提高一下,以前因为我的目的蛋白很小,所以试过15%+12%的双层分离胶 ,后来直接用梯度胶跑了。...
需要用梯度的吗?我的目的蛋白在上面,大约在Markerde 第四条带那,就是想跑一个好点的图
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10楼
2012-09-14 15:39:51
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最下面的MARKER是6.5KDa的吧。怎么这么像我师妹跑的。。。延长凝胶时间,提高分离胶浓度试试
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平生我自知
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2012-09-13 07:42:01
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2楼
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ybs007
at 2012-09-13 07:42:01
最下面的MARKER是6.5KDa的吧。怎么这么像我师妹跑的。。。延长凝胶时间,提高分离胶浓度试试
是的,最下面的是6.5KDa,分离胶用的12%的。还要提高吗?我延长凝胶时间试试,谢谢您的帮助,这个问题困扰了好久了……
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2012-09-13 10:45:49
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分离胶的tris-hcl PH是不是不准了?
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2012-09-13 11:03:55
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2012-09-14 15:40:02
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3楼
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Originally posted by
蒲公英嘟嘟
at 2012-09-13 10:45:49
是的,最下面的是6.5KDa,分离胶用的12%的。还要提高吗?我延长凝胶时间试试,谢谢您的帮助,这个问题困扰了好久了……...
你可以再提高一下,以前因为我的目的蛋白很小,所以试过15%+12%的双层分离胶 ,后来直接用梯度胶跑了。
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平生我自知
5楼
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电压方面注意了吗?我一直就用90V的跑,感觉还可以的
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6楼
2012-09-13 16:31:37
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我感觉是胶的问题,你可以试试吧配胶的所有成分都换成新的试试!
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7楼
2012-09-13 17:53:19
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flttljf
at 2012-09-13 16:31:37
电压方面注意了吗?我一直就用90V的跑,感觉还可以的
谢谢你的帮助,你一直用90V,分离胶没有改变电压吗?
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8楼
2012-09-14 15:33:48
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德馨居
at 2012-09-13 17:53:19
我感觉是胶的问题,你可以试试吧配胶的所有成分都换成新的试试!
谢谢你,我都换成新的了啊,可是还是这个样子
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9楼
2012-09-14 15:36:56
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