应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我做TA克隆，准备拿序列去测序。做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的
321/4返回列表1234下一页
查看: 3809  |  回复: 31
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fengyunqb

新虫 (小有名气)

[求助] 我做TA克隆，准备拿序列去测序。做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的

我做TA克隆，准备拿序列去测序。做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的条带就可以了吧？因为我的胶回收目的片段比较单一且比较亮。但老师说要蓝白斑筛选重组子。IPTG和X-gal.因为我没配过这东西。看能不能省掉呢？谢谢解答。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-11 11:17:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elbo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1 2012-09-12 09:37:15
肯定不能省  个人认为
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-11 11:24:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1 2012-09-12 09:38:45
如果要做菌落PCR检测就可以不用蓝白斑筛选，PCR出来有目的条带就可以测序了。如果使用蓝白斑筛选，就可省略菌落PCR这一步。
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-11 12:13:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mduaerp

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个肯定不能省，测序的话要挑阳性单克隆，不然测序结果会不准确，甚至无法测序
赞一下 回复此楼
想的太多，做的太少
4楼2012-09-11 12:16:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asdkingstar

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蓝白班选，然后菌落pcr和后面的双酶切基本上都不能省，你要知道每个步骤的原因，如果真需要省的话，双酶切是可以省的，前提是总量比较少。
赞一下 回复此楼
爱是浅浅的喜欢，喜欢是浅浅的爱。
5楼2012-09-11 12:52:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yananhl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1 2012-09-12 09:39:09
要用蓝白斑筛选啊，我们有小师妹不用试过的，但是阳性克隆结果不好，无法达到要求去测序。
赞一下 回复此楼
6楼2012-09-11 15:50:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

here0009

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1 2012-09-12 09:39:36
可以省吧，蓝白斑很多假阳性，菌液pcr p的片段长一点，假阳性还是不多的
赞一下 回复此楼
Forthemoon
7楼2012-09-11 16:04:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-12 09:40:22
最好不要省，做完全的话就是蓝白斑筛选，之后菌液PCR和酶切验证，两个结果一致了就测序。既然你PCR都做了，那就做个酶切验证吧，大小正确基本可以测序！
赞一下 回复此楼
持之以恒、永不放弃！
8楼2012-09-11 16:57:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xw19880905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个不能省呀，你做这个就是检测你是否转化成功，然后才拿去测序呀
赞一下 回复此楼
9楼2012-09-11 17:23:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hch123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1 2012-09-12 09:40:55
我一直都不用蓝白斑的，含氨苄的培养基培养，挑菌PCR有结果接好啊！
赞一下 回复此楼
脚踏实地：遇一个，学一个，会一个。。。
10楼2012-09-11 21:08:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fengyunqb 的主题更新
321/4返回列表1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22408调剂求助 +5 毂12 2026-04-09 7/350 2026-04-10 16:32 by 高维春
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 一志愿中南大学物理学，英一66，求调剂 +4 长烟旖旎 2026-04-08 5/250 2026-04-10 10:31 by 颖果儿
[考研] 087100初试311求调剂 +3 任雅琴 2026-04-09 3/150 2026-04-09 22:42 by lbsjt
[考研] 269电子信息求调剂，可转专业 +9 独酌wl 2026-04-06 9/450 2026-04-09 20:55 by laoshidan
[考研] 一志愿华工085600 331分 +6 天下ww 2026-04-09 6/300 2026-04-09 18:59 by l_paradox
[考研] 一志愿中科院105500专业总分315求调剂 +6 lallalh 2026-04-09 7/350 2026-04-09 17:51 by lallalh
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 一志愿郑州大学 22408 305分求调剂 +3 安小满zzz 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:16 by wp06
[考研] 311求调剂 +6 surte 2026-04-08 13/650 2026-04-09 14:00 by surte
[考研] 材料工程322 +18 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 19/950 2026-04-09 10:44 by cymywx
[考研] 招收有机化学、化工，药学，食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +11 emokidd 2026-04-08 12/600 2026-04-09 09:24 by wyf236
[考研] 求调剂 +7 chenxrlkx 2026-04-05 9/450 2026-04-09 09:04 by wj165256
[考研] 318求调剂 +13 ykyhsa 2026-04-05 15/750 2026-04-08 21:37 by wj165256
[考研] 304求调剂 +16 c297914 2026-04-05 17/850 2026-04-08 13:00 by grayjzr
[考研] 081700学硕，323分，一志愿中国海洋大学求调剂学校 +19 披星河 2026-04-04 19/950 2026-04-07 15:00 by 上岸快快
[考研] 295求调剂 +18 xndjjj 2026-04-04 19/950 2026-04-07 11:02 by wangjy2002
[考研] 297分083200求助 +9 aekx 2026-04-05 9/450 2026-04-06 20:57 by flysky1234
[考研] 工科277分求调剂材料 +8 上了上了上哦 2026-04-05 9/450 2026-04-05 13:05 by wwytracy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭