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fengyunqb

新虫 (小有名气)

[求助] 我做TA克隆,准备拿序列去测序。做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的

我做TA克隆,准备拿序列去测序。做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的条带就可以了吧?因为我的胶回收目的片段比较单一且比较亮。但老师说要蓝白斑筛选重组子。IPTG和X-gal.因为我没配过这东西。看能不能省掉呢?谢谢解答。
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here0009

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1 2012-09-12 09:39:36
可以省吧,蓝白斑很多假阳性,菌液pcr p的片段长一点,假阳性还是不多的
Forthemoon
7楼2012-09-11 16:04:25
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elbo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1 2012-09-12 09:37:15
肯定不能省  个人认为
2楼2012-09-11 11:24:09
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aofeng860308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1 2012-09-12 09:38:45
如果要做菌落PCR检测就可以不用蓝白斑筛选,PCR出来有目的条带就可以测序了。如果使用蓝白斑筛选,就可省略菌落PCR这一步。
3楼2012-09-11 12:13:25
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mduaerp

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个肯定不能省,测序的话要挑阳性单克隆,不然测序结果会不准确,甚至无法测序
想的太多,做的太少
4楼2012-09-11 12:16:48
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