我做TA克隆，准备拿序列去测序。做完转化以后直接做个菌液PCR检验一下是否有目的 - 分子生物 - 综合其他

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tanglian8655

金虫 (正式写手)

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专业: 药物分析

这个是不能省略的，否则结果不准确

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21楼2012-09-12 10:10:49

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sd3824289

木虫 (正式写手)

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专业: 生物化学

保险一点，除了做菌落PCR鉴定外，最好提取质粒，做个酶切鉴定（前提是目的片段有酶切位点）因为菌落PCR的阳性率比较高！

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坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！

22楼2012-09-13 09:05:24

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yiyi12

银虫 (小有名气)

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专业: 植物分类学

可以省啊。我们一直都是用amp培养基筛选后挑菌培养菌液PCR，直接测序的。

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23楼2012-09-13 22:06:23

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愤怒的小笨鸟

木虫 (正式写手)

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我也不用蓝白斑筛选，直接涂氨苄平板，再挑克隆，做菌体PCR

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24楼2012-10-31 16:36:50

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hyx312312

铁虫 (初入文坛)

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我们实验室都不做蓝白斑的，每次也是PCR检菌，然后拿去测序，也都得到了序列。

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学无止境

25楼2012-12-19 22:10:56

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liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

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专业: 环境微生物学

我不用蓝白斑筛选好多年了，实验一直挺好的，T载体用过promega的，天跟的，宝生物的。本人的实验证明宝生物的T载体最可靠，长出的转化子基本是阳性克隆。一般不需再用IPTG和X-gal。

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转向地质微生物学

26楼2012-12-19 22:35:01

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fengyunqb

引用回帖:

26楼: Originally posted by liujianmin68 at 2012-12-19 22:35:01
我不用蓝白斑筛选好多年了，实验一直挺好的，T载体用过promega的，天跟的，宝生物的。本人的实验证明宝生物的T载体最可靠，长出的转化子基本是阳性克隆。一般不需再用IPTG和X-gal。