应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，PCR技术指导
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 1037  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sweetjuan

木虫 (小有名气)

[求助] 求助，PCR技术指导

菌液PCR可以扩出来，而且目的条带很单一，但是测序结果却是空载，哪一位可以解释一下吗？我该怎么办？谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-30 15:05:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是菌落PCR还是菌液？是菌落的话可能挑到平板上的未连接的片段了。如果是菌液，就抽个质粒再做一下鉴定好了。
赞一下 回复此楼
2楼2012-08-30 15:59:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sweetjuan

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by aofeng860308 at 2012-08-30 15:59:51
是菌落PCR还是菌液？是菌落的话可能挑到平板上的未连接的片段了。如果是菌液，就抽个质粒再做一下鉴定好了。

好的，我再试试看！3Q！
赞一下 回复此楼
3楼2012-08-31 17:16:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sweetjuan

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by aofeng860308 at 2012-08-30 15:59:51
是菌落PCR还是菌液？是菌落的话可能挑到平板上的未连接的片段了。如果是菌液，就抽个质粒再做一下鉴定好了。

质粒为模板，PCR结果仍然为单一的目的条带，但是做双酶切时候总是切不开，酶没有问题，但是测序结果仍然为空载体。我不知道为什么？
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-02 20:28:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by sweetjuan at 2012-09-02 20:28:36
质粒为模板，PCR结果仍然为单一的目的条带，但是做双酶切时候总是切不开，酶没有问题，但是测序结果仍然为空载体。我不知道为什么？...

能够给我一点更详细的信息吗？比如说什么载体？什么酶？目的基因的来源，菌落PCR引物等。
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-02 21:29:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sweetjuan

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by aofeng860308 at 2012-09-02 21:29:35
能够给我一点更详细的信息吗？比如说什么载体？什么酶？目的基因的来源，菌落PCR引物等。...

PCMV-N-flag载体，EcoRI 和Xho I 目的基因来源于狂犬病毒的蛋白基因
赞一下 回复此楼
6楼2012-09-03 14:37:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by sweetjuan at 2012-09-03 14:37:57
PCMV-N-flag载体，EcoRI 和Xho I 目的基因来源于狂犬病毒的蛋白基因...

既然测序都是空载了，那就只能重新做了。菌落PCR时选择一条来自载体，一条来自目的基因的引物，这样出现假阳性的几率会很小，基本能排除了！
赞一下 回复此楼
7楼2012-09-03 18:38:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sweetjuan 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 275求调剂 +7 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:40 by 红玉佳人
[考研] 286求调剂 +7 PolarBear11 2026-03-26 7/350 2026-03-27 15:21 by caszguilin
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 299求调剂 +6 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 6/300 2026-03-27 12:43 by 果果妈咪
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +10 77chaselx 2026-03-20 10/500 2026-03-27 11:28 by wangjy2002
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭