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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于 荧光原位杂交技术（FISH） 求助
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jjivory

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于 荧光原位杂交技术（FISH） 求助 已有2人参与

最近在接触FISH的实验，样品是活性污泥，才接触只看了写文献，有的问题不太懂，还请大神来指导下。
第一问题是：样品的预处理问题，现在我的做法是离心，PFA固定，然后PBS洗脱之后加乙醇保存。看到有超声预处理，有没有必要超声？对于活性污泥这种样品如何处理？
第二个问题是：拍照的时候视野选择，我用的共聚焦显微镜，由于杂交不均匀可能有的视野荧光面积比较多 有的视野比较少，怎样进行视野选择优化，之前看到有建议多层扫描的，但是我点样的时候是一滴直接滴在玻片上的，应该是中间厚两边薄。
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1楼 2014-08-05 19:44:27
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jjivory

新虫 (初入文坛)
大神快来
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2楼2014-08-05 19:45:39
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jjivory

新虫 (初入文坛)
我定一下
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3楼2014-08-05 19:58:31
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wszl666

银虫 (著名写手)
大侠快来
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基因敲除
4楼2014-08-06 10:55:17
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jjivory

新虫 (初入文坛)
就这样沉了啊
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5楼2014-08-07 18:40:59
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yangna5839

金虫 (正式写手)
4000rpm离心5min后取上清液弃污泥再进行高速离心弃上清液，接下来与你样品固定一样，看能否解决你的问题！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2014-09-28 05:56:47
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yangna5839

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可购买带涂层的平底载玻片就会解决中间厚边缘薄的问题

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2014-09-28 06:01:48
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