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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » cRNA原位杂交探针
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hongdou83917065

铁虫 (初入文坛)

[求助] cRNA原位杂交探针

最近在做原位杂交的探针，自己用试剂盒合成的cRNA探针240bp左右，但是电泳之后发现，从上样孔一直到240bp出都有弥散，想请问是什么原因，这样的探针还能用吗？
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耶和华是我的牧者
1楼 2012-08-28 16:58:27
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
上样前将探针在80度水浴中处理5分钟，冰浴。电泳时间5-10分钟，弥散的情况会好转。另，RNA探针本来就有点弥散，不碍事的。
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2楼2012-08-28 17:52:21
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hongdou83917065

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lixg at 2012-08-28 17:52:21
上样前将探针在80度水浴中处理5分钟，冰浴。电泳时间5-10分钟，弥散的情况会好转。另，RNA探针本来就有点弥散，不碍事的。

再请教个问题，做原位杂交实验，一些塑料盒东西用氯仿泡的，之后要用酒精和DEPC处理水洗掉吗？能处理干净吗？
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耶和华是我的牧者
3楼2012-08-30 07:59:04
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stanwang626

铜虫 (小有名气)
原位杂交中在探针收集后和半定量之前加入的tRNA是不是酵母RNA ？？？ 这个怎么弄
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4楼2012-09-24 19:56:25
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Maryqin

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lixg at 2012-08-28 17:52:21
上样前将探针在80度水浴中处理5分钟，冰浴。电泳时间5-10分钟，弥散的情况会好转。另，RNA探针本来就有点弥散，不碍事的。

你好，做过RNA探针和中期染色体的杂交么?这和DNA与DNA杂交有什么条件上的要求么？
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5楼2012-12-16 16:27:25
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by hongdou83917065 at 2012-08-30 07:59:04
再请教个问题，做原位杂交实验，一些塑料盒东西用氯仿泡的，之后要用酒精和DEPC处理水洗掉吗？能处理干净吗？...

氯仿泡过的直接晾干即可
赞一下 回复此楼
6楼2012-12-16 21:23:33
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