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jjivory

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于 荧光原位杂交技术(FISH) 求助 已有2人参与

最近在接触FISH的实验,样品是活性污泥,才接触只看了写文献,有的问题不太懂,还请大神来指导下。
第一问题是:样品的预处理问题,现在我的做法是离心,PFA固定,然后PBS洗脱之后加乙醇保存。看到有超声预处理,有没有必要超声?对于活性污泥这种样品如何处理?
第二个问题是:拍照的时候视野选择,我用的共聚焦显微镜,由于杂交不均匀可能有的视野荧光面积比较多 有的视野比较少,怎样进行视野选择优化,之前看到有建议多层扫描的,但是我点样的时候是一滴直接滴在玻片上的,应该是中间厚两边薄。
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yangna5839

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可购买带涂层的平底载玻片就会解决中间厚边缘薄的问题

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
7楼2014-09-28 06:01:48
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yangna5839

金虫 (正式写手)

4000rpm离心5min后取上清液弃污泥再进行高速离心弃上清液,接下来与你样品固定一样,看能否解决你的问题!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2014-09-28 05:56:47
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