应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot
111/2返回列表12下一页
查看: 750  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

傻饭

新虫 (初入文坛)

[交流] western blot 已有4人参与

SDS-PAGE能够跑出目的条带，可western blot却跑不出目的条带，恳请各位前辈指点迷津。万分感激。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
傻并快乐着
1楼 2012-08-28 11:58:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanglian8655

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你这个问题问的有点笼统哦
需要摸索反应条件，分析你的蛋白是否转到膜上了，抗体的特异性是否良好等
赞一下 回复此楼
2楼2012-08-28 13:13:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是啊 ，你的问题太模糊了 ，说的可以再仔细点不咯！！
赞一下 回复此楼
生物化学与分子生物学
3楼2012-08-28 17:00:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)
把你的实验条件讲一下，这样才能具体分析
赞一下 回复此楼
4楼2012-08-29 08:37:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linatracy

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
WB反应是很灵敏的，量很少就可以有反应，在确保实验操作全部正确的情况下，有可能你的目的蛋白没有反应活性。
赞一下 回复此楼
5楼2012-08-29 17:44:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

傻饭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tanglian8655 at 2012-08-28 13:13:26
你这个问题问的有点笼统哦
需要摸索反应条件，分析你的蛋白是否转到膜上了，抗体的特异性是否良好等

转膜的时间、电流；一二抗的浓度都摸索了。依旧不行。
赞一下 回复此楼
傻并快乐着
6楼2012-09-06 20:51:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

傻饭

新虫 (初入文坛)
我在做原核表达的时候，分别从IPTG浓度、时间、温度三方面对表达条件进行了优化，SDS检测，通过分子量及蛋白表达量的变化确定我的目的蛋白正确。但做到WB的时候，我的目的蛋白无论如何也转不到膜上。膜上出来的条带都是杂带，没有我的目的带。
赞一下 回复此楼
傻并快乐着
7楼2012-09-06 20:55:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

傻饭

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by linatracy at 2012-08-29 17:44:05
WB反应是很灵敏的，量很少就可以有反应，在确保实验操作全部正确的情况下，有可能你的目的蛋白没有反应活性。

我的是跨膜蛋白，有信号肽，扩膜结构。是否这些对表达有影响？
赞一下 回复此楼
傻并快乐着
8楼2012-09-06 20:56:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

傻饭

新虫 (初入文坛)
说的再直接一点就是：SDS的时候有目的带，大小为55.但WB的时候，55带没有，只有55以下的带。但marker170的带都有，所以我排除了转膜时间过短的问题。
赞一下 回复此楼
傻并快乐着
9楼2012-09-06 20:59:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanglian8655

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 傻饭 at 2012-09-06 20:51:21
转膜的时间、电流；一二抗的浓度都摸索了。依旧不行。...

那你的抗原和抗体呢？
赞一下 回复此楼
10楼2012-09-06 21:30:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 傻饭 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +10 Tide man 2026-08-11 10/500 2026-08-12 20:59 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 不应该看fileCode +5 且听虎啸 2026-08-12 6/300 2026-08-12 16:26 by Tide man
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭