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傻饭

新虫 (初入文坛)

[交流] western blot 已有4人参与

SDS-PAGE能够跑出目的条带,可western blot却跑不出目的条带,恳请各位前辈指点迷津。万分感激。
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傻并快乐着
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傻饭

新虫 (初入文坛)

我在做原核表达的时候,分别从IPTG浓度、时间、温度三方面对表达条件进行了优化,SDS检测,通过分子量及蛋白表达量的变化确定我的目的蛋白正确。但做到WB的时候,我的目的蛋白无论如何也转不到膜上。膜上出来的条带都是杂带,没有我的目的带。
傻并快乐着
7楼2012-09-06 20:55:52
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tanglian8655

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这个问题问的有点笼统哦
需要摸索反应条件,分析你的蛋白是否转到膜上了,抗体的特异性是否良好等
2楼2012-08-28 13:13:26
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lidonghong

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是啊 ,你的问题太模糊了 ,说的可以再仔细点不咯!!
生物化学与分子生物学
3楼2012-08-28 17:00:37
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jl860822

金虫 (正式写手)


把你的实验条件讲一下,这样才能具体分析
4楼2012-08-29 08:37:23
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