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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR 连接转化不长菌
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tztboy

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR 连接转化不长菌

最近在做克隆 片段长度 1700bp左右，载体用的FLAG-P48，置换酶切后跑胶如下：注：转化先将连接好的载体和片段 （目的片段12微升洗脱七八微升，载体8微升洗脱 2微升连接 ）加入到在冰上融化的感受态细胞（纯质粒转化已验证感受态细胞工作良好），冰上放置20分钟，42°热激80-90S，再冰上放置2分钟，转化涂板（用的氨苄板，纯质粒转化工作）但是就是不长菌
  请求各位大侠！急已经两个月了，做了好多次，换过好多条件
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1楼 2012-08-27 17:30:34
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biocherry

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by tztboy at 2014-03-09 13:04:13
一年半后才来回复您，非常谢谢您的帮助，现在所有的都工作正常了，具体问题还是没有找到，但是现在克隆做的超级顺利。非常感谢...

遇到同样问题，克隆长不出来
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8楼2014-08-22 11:14:53
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