应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR批出非目标带，空白对照都有，重复进行，有时有，有时没有，咋回事？
51/1返回列表
查看: 1677  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

三国恋

银虫 (小有名气)

[求助] PCR批出非目标带，空白对照都有，重复进行，有时有，有时没有，咋回事？

图中 10,11,12泳道为不同模版同种引物P的结果，14为水为模板的空白对照，2000M为DL 2000marker,目标带在224bp左右，最上面的条带是什么啊，怎么连水都能做出来啊。哪位大神能给帮助下啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-26 10:23:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-08-26 20:41:16
楼主的引物是扩增的什么基因，如果是细菌或病毒也是有可能的，水里也会有。首先要看你的引物设计的是否真的特异。
然后，楼主把你的PCR水换一下看，你的水是自己灭菌的嘛还是买的，如果是自己灭菌的，就在用买的水做个对照看。
赞一下 回复此楼
3楼2012-08-26 19:28:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

wittyjc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2012-08-26 20:41:09
三国恋: 金币+3, ★有帮助 2012-08-28 10:40:37
10道是蛋白杂质？不确定。
1500到2000的条带可能是体系的污染，连空白对照中也有。也有可能是这对引物就是能p出两个条带，然后空白道有可能是你点样的时候把12道的样品流到13道空白道中，也有可能是体系污染。我一般会把空白和样品点在MARK两边。
愚见。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-08-26 11:13:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-27 13:44:07
三国恋: 金币+2, ★有帮助 2012-08-28 10:40:30
1：10泳道感觉是有蛋白污染，楼主的模板是基因组麽？
2:  其次每个泳道都在1500bp左右出现条带，可能原因有两个，首先，体系里面有污染，酶，引物，跟水，都换一遍，其次设计的引物的特异性高不高？
赞一下 回复此楼
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
4楼2012-08-27 08:38:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三国恋

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Marado at 2012-08-27 08:38:22
1：10泳道感觉是有蛋白污染，楼主的模板是基因组麽？
2:  其次每个泳道都在1500bp左右出现条带，可能原因有两个，首先，体系里面有污染，酶，引物，跟水，都换一遍，其次设计的引物的特异性高不高？

我是做的动物线粒体DNA PCR，模板是提取的线粒体DNA，应该还有大量的基因组DNA，曾经也做出过空白有条带，也是这么大小，换了引物，水，结果就没了，现在又出现了，不知道咋回事，这个实验同时还有一起做其他的引物的，试剂共用，其他的引物空白就没有，就这个有。
赞一下 回复此楼
6楼2012-08-28 10:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271材料工程求调剂 +3 .6lL 2026-03-18 3/150 2026-03-18 14:36 by laoshidan
[考研] 化学工程321分求调剂 +14 大米饭！ 2026-03-15 17/850 2026-03-18 12:40 by Linda Hu
[考研] 344求调剂 +5 knight344 2026-03-16 5/250 2026-03-18 12:39 by 学员HHvs9Y
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 求调剂，总分315，考的生物医药，一志愿湖南师范大学。调剂到任何专业都可以 +4 小丁想进步 2026-03-11 5/250 2026-03-17 16:05 by 外星文明
[考研] 290求调剂 +6 孔志浩 2026-03-12 11/550 2026-03-17 14:41 by 周舟舟77
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 283求调剂 +10 小楼。 2026-03-12 14/700 2026-03-16 16:08 by 13811244083
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭