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jackenmickey

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windsor2011

银虫 (小有名气)


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是否是因为纯化过程中温度的问题
只要功夫深铁杵磨成针
2楼2012-08-23 09:32:46
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jackenmickey

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3楼2012-08-23 09:39:13
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windsor2011

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
哦,那就看看你纯化用的试剂是否对你的酶有干扰。
只要功夫深铁杵磨成针
4楼2012-08-23 10:18:13
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jackenmickey

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5楼2012-08-23 10:48:28
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tiani_tan

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
需要分析一下纯化过程中是否引入了酶活力抑制剂之类的
6楼2012-08-23 12:28:42
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jackenmickey

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7楼2012-08-23 12:41:44
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daguo0648

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-24 13:51:23
引用回帖:
5楼: Originally posted by jackenmickey at 2012-08-23 10:48:28
我用Ni柱进行纯化的,洗脱杂蛋白用的是30mM咪唑,目的蛋白是400mM咪唑,难道是咪唑对我的酶活有影响吗?...

咪唑对酶活是有影响的,何况是在400mM咪唑这么高的浓度,你需要查一下,该酶在什么体系下使用活性最好,然后把蛋白透析到带体系中,通常酶的使用是要加入甘油的,最好含有1~2mMDTT保护其活性。你的现象肯定是纯化后的体系对酶活有影响,透析后会好的。
小小爬虫
8楼2012-08-23 16:22:12
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101202139

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
应该就是咪唑的问题,我们纯化后的酶都是要去咪唑的!
9楼2012-08-24 10:53:08
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jackenmickey

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10楼2012-08-26 20:09:13
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