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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 纤维素酶的专家能不能帮帮我
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分子结构

金虫 (小有名气)

[交流] 纤维素酶的专家能不能帮帮我

最近在筛产纤维素酶的菌，筛出一株酶活很低的真菌，老板让我做做看，我实在不知道，这年头随便抓住一株菌能做些啥，要是有啥特征就罢了，关键是酶活太低，实在不知道该研究些啥，有没有专家帮我出出主意，看看我这小硕该如何毕业啊。。。。
      在此万分感谢。。。。。。
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1楼 2012-05-20 14:56:32
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余晓燕

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
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rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-31 22:30:15
反正筛菌很繁琐的，要有耐心哦~~~~我以前的毕业论文也是纤维素降解菌的筛选，我觉得你要优化培养基配方，关键是发酵培养基配方的碳氮源的比例，还有就是测定酶活的方法和纤维素酶活的定义，主要现在国际上好像还没有统一的纤维素酶活的定义标准，所以我觉得应该还有个对照菌，这样就可以对比该真菌的酶活到底是低了还是高了，诱变的时候要保护好自己，紫外诱变很伤人的。。。。不知道我说的这些有没有用，祝你成功啊。。。
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4楼2012-05-20 20:38:10
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tianjiannl

木虫 (正式写手)
★
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无论如何也不该担心小硕的毕业问题，不是有句话么--没有考不上的博，没有毕业不了的硕。
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9楼2012-05-20 21:55:46
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swnz

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
分子结构: 金币+1 2012-06-26 12:51:57
“没有考不上的博，没有毕业不了的硕。”确实是这样，愿意出力干活的人不算多，再说心那么诚，肯定要你啦。没见很多高校招生招不满吗。关键是你本人能得到什么。
言归正传，建议分子结构去买一株好点的菌株，或者从纤维素酶产品中去分离，机会大多了。
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29楼2012-06-25 17:19:40
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hkfgwww

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
诱变筛菌优化培养基，没一点新意啊
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6楼2012-05-20 21:44:55
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
随便筛菌的确没意思...嗜热或者嗜冷等极端环境的产酶真菌还可以克隆些新基因...
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8楼2012-05-20 21:53:01
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DoRbIr

金虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
11楼: Originally posted by 分子结构 at 2012-05-21 11:28:07:
能不能说说同步糖化发酵，比较感兴趣~

就是葡萄糖对纤维素酶有反馈抑制，不利于充分利用纤维素。因此，想把酵母和纤维素酶混合到一起，同步糖化发酵，解除反馈抑制。但是，纤维素酶的最适温度比酵母的高。所以，要寻找低温纤维素酶。
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22楼2012-05-23 11:33:30
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豆豆菜虫

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 余晓燕 at 2012-05-20 20:38:10
反正筛菌很繁琐的，要有耐心哦~~~~我以前的毕业论文也是纤维素降解菌的筛选，我觉得你要优化培养基配方，关键是发酵培养基配方的碳氮源的比例，还有就是测定酶活的方法和纤维素酶活的定义，主要现在国际上好像还没有 ...

曾经的曾经我诱变菌种大约有一年的时间  难怪我现在脑子不好使了 哈哈哈
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23楼2012-05-28 16:33:45
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余晓燕

铜虫 (小有名气)
★ ★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-31 22:30:24
你可以用物理诱变和化学诱变的方法增加酶活。
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3楼2012-05-20 20:29:55
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vizy

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-31 22:30:30
一方面可以先优化一下培养基，比如碳源，氮源之类的，在优化一下培养条件，比如温度，时间，PH之类的，另一方面还可以继续筛菌。一般的套路就是筛菌，优化，也可以诱变，之后鉴定菌种。就差不多可以毕业了。
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5楼2012-05-20 21:14:01
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DoRbIr

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是产低温纤维素酶吗？那个可以作同步糖化发酵
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分子结构
7楼2012-05-20 21:44:56
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robert-RBT

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
菌株纤维素酶活性低，是测定的发酵液的酶活性吗？纤维素酶一般是诱导型的，需要以纤维素为唯一碳源诱导，然后测定酶活性。
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10楼2012-05-21 09:34:53
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分子结构

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by DoRbIr at 2012-05-20 21:44:56:
是产低温纤维素酶吗？那个可以作同步糖化发酵

能不能说说同步糖化发酵，比较感兴趣~
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11楼2012-05-21 11:28:07
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分子结构

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by robert-RBT at 2012-05-21 09:34:53:
菌株纤维素酶活性低，是测定的发酵液的酶活性吗？纤维素酶一般是诱导型的，需要以纤维素为唯一碳源诱导，然后测定酶活性。

加了麸皮为诱导源，测得是发酵液的酶活。酶活很低
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12楼2012-05-21 11:29:41
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iaminxanadu

木虫 (正式写手)
★ ★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-31 22:30:50
可以做的很多啊
酶活很低，你可以研究为什么低啊~
这个都够做几个博士论文了

知道为啥低以后，可以对进一步改造或为类似的菌育种提供借鉴啊~
意义是有的，看你怎么去挖掘。
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13楼2012-05-21 11:41:54
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robert-RBT

木虫 (小有名气)
★ ★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-31 22:30:55
麦麸一般用于固体发酵，可以尝试用CMC、秸秆等作为碳源诱导，适当延长发酵时间，优化发酵条件。
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14楼2012-05-21 16:19:15
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liuziyong

金虫 (小有名气)
★ ★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-31 22:31:01
找一个模式菌株 例如瑞氏木霉 比较着研究  是个很好的方法  都是从最基础做起的
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15楼2012-05-21 19:13:19
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liushuyan

禁虫 (知名作家)
★
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本帖内容被屏蔽
16楼2012-05-21 19:40:50
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★
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先说你什么年级，所在学校硕士毕业的要求，现有的这个菌株是什么菌，用什么营养条件得到多少酶活力，你的酶活力怎么定义。
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17楼2012-05-21 19:54:31
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jpp9898

金虫 (正式写手)
★ ★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-31 22:31:10
实在不行就重新筛选一下呗，我给你介绍一个菌，黑曲霉的纤维素分解的能力很强的，你可以试试！！还有就是你可以做一个全套的啊！比如说分解菌加酵母菌直接产生酒精之类的，可以做一些复合菌群啊！都是比较有出路的啊！！
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18楼2012-05-22 16:32:10
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
分子结构: 金币+1 2012-05-31 09:55:04
引用回帖:
8楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2012-05-20 21:53:01:
随便筛菌的确没意思...嗜热或者嗜冷等极端环境的产酶真菌还可以克隆些新基因...

我同门师兄弟从宏基因组中PCR出127条纤维素酶基因，但不好异源表达
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19楼2012-05-23 00:05:00
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
分子结构: 金币+3 2012-05-31 09:55:14
引用回帖:
19楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2012-05-23 00:05:00:
我同门师兄弟从宏基因组中PCR出127条纤维素酶基因，但不好异源表达

PCR得到的基因有个隐患，不一定是全长，所以可能会遇到即使是表达出来也是包涵体占主要的，或者是有可溶性蛋白质但是在平板上没有活性。
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20楼2012-05-23 00:19:15
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
感觉还是应用结合到一起更有意义。
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21楼2012-05-23 06:38:08
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war3one

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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分子结构: 金币+5 2012-05-31 09:54:14
1.鉴定菌种，构建进化树，对所产纤维素酶的性质进行鉴定
2.发酵培养基的优化
3.与黑曲霉共发酵
4.酶液纤维素酶纯化，对生物质进行降解
5.葡萄糖苷酶基因在酵母中表达，发酵酶液生产乙醇
就想了这么多
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25楼2012-05-30 17:18:32
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墨香若水

木虫 (著名写手)
★
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16s看看是什么菌， 如果这个菌的纤维素酶没有人克隆过，可以考虑分子克隆再表达~
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26楼2012-05-31 11:23:10
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分子结构

金虫 (小有名气)
引用回帖:
26楼: Originally posted by 墨香若水 at 2012-05-31 11:23:10
16s看看是什么菌， 如果这个菌的纤维素酶没有人克隆过，可以考虑分子克隆再表达~

嗯，我鉴定了，是一种低温菌，但我感觉它产的酶不是低温酶，真怪。。。。
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27楼2012-05-31 18:47:07
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余晓燕

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
23楼: Originally posted by 豆豆菜虫 at 2012-05-28 16:33:45
曾经的曾经我诱变菌种大约有一年的时间  难怪我现在脑子不好使了 哈哈哈...

我手上长了痣，我都觉得是我做诱变实验给诱变的。。嘿嘿
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28楼2012-06-25 16:47:29
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kevin0317

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
悲剧啊 像这种课题最害人了 毕业是没问题 怎么都能让你毕业的 关键你没接触到什么东西 也没学到什么 悲哀啊
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30楼2012-06-26 14:08:25
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分子结构

金虫 (小有名气)
引用回帖:
30楼: Originally posted by kevin0317 at 2012-06-26 14:08:25
悲剧啊 像这种课题最害人了 毕业是没问题 怎么都能让你毕业的 关键你没接触到什么东西 也没学到什么 悲哀啊

同感~同感~
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31楼2012-06-26 15:01:19
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xujie1986

银虫 (小有名气)
★ ★
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-02 21:36:48
筛菌确实是一件很烦人的饿事，我以前本科也做过的。。。酶活很低的话你可以试试能不能再筛到更好的酶活更高的菌。。。。如果实在没有的话你就尝试下以纤维素为唯一碳源诱导下。。。或者也可以考虑下用UV诱变话化学试剂诱变一下，或者采用基因工程手段改造下这株菌的基因。。。把纤维素酶基因导入再试试。。。。但是不用担心，硕士都会很顺利毕业的。。。
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32楼2012-06-26 21:58:52
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分子结构

金虫 (小有名气)
引用回帖:
32楼: Originally posted by xujie1986 at 2012-06-26 21:58:52
筛菌确实是一件很烦人的饿事，我以前本科也做过的。。。酶活很低的话你可以试试能不能再筛到更好的酶活更高的菌。。。。如果实在没有的话你就尝试下以纤维素为唯一碳源诱导下。。。或者也可以考虑下用UV诱变话化学试 ...

谢谢，我会努力
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33楼2012-06-27 20:36:29
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环境因子

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-02 21:36:55
热稳定、pH稳定、抗噬菌体·······，反正和应用相关的性能，我觉得都可以做一下。
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34楼2012-07-02 21:30:52
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martingong

新虫 (初入文坛)
★
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29楼: Originally posted by swnz at 2012-06-25 17:19:40
“没有考不上的博，没有毕业不了的硕。”确实是这样，愿意出力干活的人不算多，再说心那么诚，肯定要你啦。没见很多高校招生招不满吗。关键是你本人能得到什么。
言归正传，建议分子结构去买一株好点的菌株，或者从 ...

这个方法可行呢
我做过
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35楼2015-05-05 16:23:07
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martingong

新虫 (初入文坛)
★
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19楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2012-05-23 00:05:00
我同门师兄弟从宏基因组中PCR出127条纤维素酶基因，但不好异源表达...

我做的是也是改过基因的酵母菌，生产纤维素酶的  求指导
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36楼2015-05-05 16:26:02
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jyingchem2楼
2012-05-20 15:18   回复  
分子结构24楼
2012-05-28 17:41   回复  
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23楼: Originally posted by 豆豆菜虫 at 2012-05-28 16:33:45 曾经的曾经我诱变菌种大约有一年的时间 难怪我现在脑子不好使了 哈哈哈...

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