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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶纯化后没有活性
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jackenmickey

禁虫 (正式写手)
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1楼2012-08-22 22:06:30
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daguo0648

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-24 13:51:23
引用回帖:
5楼: Originally posted by jackenmickey at 2012-08-23 10:48:28
我用Ni柱进行纯化的，洗脱杂蛋白用的是30mM咪唑，目的蛋白是400mM咪唑，难道是咪唑对我的酶活有影响吗？...

咪唑对酶活是有影响的，何况是在400mM咪唑这么高的浓度，你需要查一下，该酶在什么体系下使用活性最好，然后把蛋白透析到带体系中，通常酶的使用是要加入甘油的，最好含有1~2mMDTT保护其活性。你的现象肯定是纯化后的体系对酶活有影响，透析后会好的。
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小小爬虫
8楼2012-08-23 16:22:12
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