24小时热门版块排行榜

返回列表

ljw0931

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 648
散金: 2
红花: 1
帖子: 57
在线: 19.9小时
虫号: 190186
注册: 2006-02-19
性别: GG
专业: 作物分子育种

[求助] 第一次跑PCR，很不理想，请各位同仁指教！

1%琼脂糖凝胶电泳，110v下跑了50min，跑出去了，但是扩增的带不亮，请指教？

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

pcr不出，心情很down 已经有33人回复
急急急！巢式PCR，第二轮产物跑胶点样孔有亮带，似有东西跑不出已经有7人回复
PCR试剂和DNA模版加了以后，不马上跑PCR，可以先放PCR管在-20度吗已经有23人回复
金属复合材料的扫描图片总是很模糊，请各位大侠指教!金币不多哈，尽请见谅已经有37人回复
RT-PCR时GAPDH能跑出来，但目的条带跑不出来~~ 已经有7人回复
降落PCR一直跑不出来（用于DGGE）已经有16人回复
PCR电泳，加样孔很亮，但目的条带却很淡，不知道怎么回事？已经有24人回复
流感病毒RT-PCR，电泳老是跑不出条带~~~纠结！已经有5人回复
请教各位前辈为什么我做菌落PCR总也P不出来已经有28人回复
求定位北美，开学研二，希望尽早入学，可以放弃这边的学位~谢谢各位！已经有8人回复
【求助/交流】PCR结果不理想，请教高手。已经有17人回复
【求助】为什么摸条件时点分得明明都很开，可是一跑柱子就分不开？请各位老师帮帮我！已经有3人回复
【求助/交流】为什么PCR产物第一次跑电泳有结果，第二次就什么也没有了已经有12人回复
【求助/交流】向各位大虾请教“易错PCR” 已经有4人回复

1楼 2012-08-20 23:42:11

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cellline

木虫 (正式写手)

MolEPI: 1
应助: 3 (幼儿园)
金币: 1890
红花: 4
帖子: 329
在线: 103小时
虫号: 445222
注册: 2007-10-28
性别: GG
专业: 病毒学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+3, 回答很好 2012-08-21 07:24:19

首先电泳应该没问题吧，加样的时候应该没有手抖吧，110v high了50分钟，有点浪费国家资源的嫌疑
PCR扩增不亮考虑3个方面的问题
1、模板是否纯净，蛋白、其他非目的核酸或盐尽量少
2、引物是否特异，
3、扩增时退火温度是否合适
最后，还是建议多看书，多问师兄师姐，这是捷径中的捷径！
Bless you！