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allegro1741

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2801
散金: 17
帖子: 95
在线: 38.2小时
虫号: 1617000
注册: 2012-02-14
性别: GG
专业: 发育生物学

[求助] Q-PCR和RT-PCR结果不一致呢？

做了两次定量（Q）-PCR，一个基因的转录量都是降低的，可每次做半定量（RT）-PCR结果又显示升高，这是怎么回事？半定量的cDNA也经过稀释，不存在饱和现象...

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1楼2012-08-13 15:05:27

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chenguestc

木虫 (职业作家)

MolEPI: 7
应助: 576 (博士)
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在线: 353.5小时
虫号: 1337860
注册: 2011-07-05
性别: GG
专业: 作物分子育种

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

楼主，还需要考虑另外一个问题，做普通RT时用的PCR 成分都是普通的，而Q用的是公司定制的，其BUFFER差异很大，因为公司定的BUFFER我们不知道里面的具体成分，因此，两者结果不一致也正常。再者二者反应条件也不完全一致。

3楼2012-08-14 19:49:54

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