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古木天恕

木虫 (正式写手)

[求助] 酵母DNA提取

酵母DNA提取是有专门的DNA提取试剂盒还是用真菌的提取试剂盒也可以?
或者用细菌的试剂盒也提的出来?
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zjutboss

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我刚做过,用fastDNA SPIN Kit for soil 6540-403  效果很好
6楼2012-08-15 14:06:27
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
scelab: 金币+3, MicEPI+1, 谢谢热心回复~ 2012-08-13 11:24:06
个人经验:
是有专门的酵母基因组提取试剂盒的。但是我一般都是自配试剂提基因组,效果很好,可用于检测,PCR等,纯度和浓度都很好。

附简步骤:
1.接菌培养,得菌体。
2.200uL lysis  buffer(2% Triton X100,1%SDS,100mM NaCl,10mM Tris-HCl(pH8.0),1mM EDTA(pH8.0)重悬。
3.-80度2min,沸水浴1min,重复3次(越多越好)。
4.加200uL氯仿,重悬,12000rpm 2 min。
5.取上清加400uL冰预冷无水乙醇,得沉淀。
6.70%乙醇洗。
7.60度干燥。
8.溶于20uL 灭菌水。
3楼2012-08-13 10:02:42
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tao666tao666

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
赞同楼上的,不过裂解法纯度不好,如有条件用酵母试剂盒

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2012-08-15 07:12:57
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banana08162707

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, 欢迎来微生物板块交流 2012-09-08 17:04:41
你们做环境微生物的,估计做这方面试验不多,2楼的方法很好,但是有时候需要熟练和摸索,相对应的,就是需要更多的时间和不断重复。不如用试剂盒快捷,酵母基因组试剂盒这几年已经很多了,效果还不错。由于酵母细胞壁结构的特点,不建议跟细菌基因组或是真菌基因组试剂盒混用。有时候,酵母基因组试剂盒可以抽提细菌的,但反之,效果较差。有机会可以试一试的。
5楼2012-08-15 11:09:01
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