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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 酵母DNA提取
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古木天恕

木虫 (正式写手)

[求助] 酵母DNA提取

酵母DNA提取是有专门的DNA提取试剂盒还是用真菌的提取试剂盒也可以？
或者用细菌的试剂盒也提的出来？
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1楼 2012-08-13 08:37:11
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
scelab: 金币+3, MicEPI+1, 谢谢热心回复~ 2012-08-13 11:24:06
个人经验：
是有专门的酵母基因组提取试剂盒的。但是我一般都是自配试剂提基因组，效果很好，可用于检测，PCR等，纯度和浓度都很好。

附简步骤：
1.接菌培养，得菌体。
2.200uL lysis  buffer（2% Triton X100，1%SDS，100mM NaCl，10mM Tris-HCl（pH8.0），1mM EDTA（pH8.0）重悬。
3.-80度2min，沸水浴1min，重复3次（越多越好）。
4.加200uL氯仿，重悬，12000rpm 2 min。
5.取上清加400uL冰预冷无水乙醇，得沉淀。
6.70%乙醇洗。
7.60度干燥。
8.溶于20uL 灭菌水。
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3楼2012-08-13 10:02:42
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普通回帖

古木天恕

木虫 (正式写手)
怎么没人回呢~~~
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2楼2012-08-13 09:14:43
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tao666tao666

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
赞同楼上的，不过裂解法纯度不好，如有条件用酵母试剂盒

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2012-08-15 07:12:57
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banana08162707

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, 欢迎来微生物板块交流 2012-09-08 17:04:41
你们做环境微生物的，估计做这方面试验不多，2楼的方法很好，但是有时候需要熟练和摸索，相对应的，就是需要更多的时间和不断重复。不如用试剂盒快捷，酵母基因组试剂盒这几年已经很多了，效果还不错。由于酵母细胞壁结构的特点，不建议跟细菌基因组或是真菌基因组试剂盒混用。有时候，酵母基因组试剂盒可以抽提细菌的，但反之，效果较差。有机会可以试一试的。
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5楼2012-08-15 11:09:01
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zjutboss

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我刚做过，用fastDNA SPIN Kit for soil 6540-403  效果很好
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6楼2012-08-15 14:06:27
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无疆@行者

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

大学的时候做过，我们是其中一步是玻璃珠震荡
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7楼2012-09-08 02:09:09
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