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guoxinkun1

金虫 (初入文坛)

[求助] 求助啊,PCR高手求解啊....

我用rtaq酶p我的目的产物,条带大小都对,就是很细,弯弯的像月牙,也没法回收,这是哪个环节出了问题,求助啊,我可能说不清楚,所以截了两张图...谢谢啊..



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勇往直前
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-08 14:21:11
PCR没问题,跑胶的问题。一是减少上样量和核酸染料使用量,然后跑电压低一点,时间短一点;二是如果做胶回收可以考虑先电泳后染色。
最好自己重新配新的电泳缓冲液来用。
为什么
7楼2012-08-07 16:51:09
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查看全部 14 个回答

gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-08-07 15:39:25
能否可以上传完整的图?结果是就它一条带,还是有许多的杂带?
还有你的程序是怎么设置的?
你可以做一个温度梯度,在引物的TM左右5度的样子,多P几管试试。
2楼2012-08-07 08:53:10
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guoxinkun1

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gelois at 2012-08-07 08:53:10
能否可以上传完整的图?结果是就它一条带,还是有许多的杂带?
还有你的程序是怎么设置的?
你可以做一个温度梯度,在引物的TM左右5度的样子,多P几管试试。

旁边的是maker,没有咋带,就是我的目的条带,我的退火温度就是低5到6度啊,
勇往直前
3楼2012-08-07 10:45:58
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青菜小虫

银虫 (著名写手)

风居住的街道

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这种情况我之前常遇到过,应该是你做的胶的问题或电泳液是不是该换了。还有制胶的TAE重新换一下吧~
生命即这般无尽变数,辗转来去皆苛求不得
4楼2012-08-07 10:49:07
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