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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 发酵罐 起泡
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gaoqian8717

金虫 (小有名气)

[交流] 发酵罐 起泡

最近做了两罐实验，出现一个比较费解的现象。大家帮忙分析下：
第一罐：KH2PO4含量0.05 g/L;发酵罐过滤膜是用了近1一个月，期间有过实消的时候培养基回流到过滤膜导致膜变脏变黑，但这样似乎也没有影响到染菌。这一罐情况正常，接种是加了点消泡剂，一直很好，中间发酵到7h时起泡至罐顶部未喷出，补加了几滴消泡剂。后来就一直到发酵结束（48h）一点泡沫都没起。
第二罐：不加KH2PO4；过滤膜被换成新的。 接种时一样加了消泡剂，其他条件同上一罐。但是发酵6h时起泡至罐顶，补加消泡剂。后面就和第一罐很大不同了，发酵至7-8h时又起泡至罐顶喷出100ml左右（当时吃饭去了，因为第一罐的情况较好，所以有些大意了）；后面就不停的起泡，呼呼的起，每隔1h就起到罐一半的位置，就得加消泡剂。结果菌体干重严重下降，没长起来。
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liurechen

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1楼 2012-08-03 11:04:40
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回帖置顶 ( 共有6个 )

robert-RBT

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
gaoqian8717(金币+1): 谢谢参与
gaoqian8717: 金币+5 2012-08-04 23:08:20
检查是否污染了。单一的KH2PO4不应该影响这么大。更换滤膜应进行彻底的管道消毒灭菌。
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2楼2012-08-03 21:07:16
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gaoqian8717

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by robert-RBT at 2012-08-03 21:07:16
检查是否污染了。单一的KH2PO4不应该影响这么大。更换滤膜应进行彻底的管道消毒灭菌。

更换滤膜后是带着滤膜进行实消的，我也怀疑是染菌了，但是最后镜检了下没有看见杂菌，我就觉得很奇怪了
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3楼2012-08-04 23:09:44
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robert-RBT

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gaoqian8717 at 2012-08-04 23:09:44
更换滤膜后是带着滤膜进行实消的，我也怀疑是染菌了，但是最后镜检了下没有看见杂菌，我就觉得很奇怪了...

如果是细菌发酵，镜检是很难发现的；真菌发酵还可以看到细菌污染，但类似真菌污染则很难发现。建议重复一下，或稀释后进行平板CFU检测一下。以前做过真菌发酵，起泡很厉害，结果就是污染了。
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4楼2012-08-05 01:20:57
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gaoqian8717

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by robert-RBT at 2012-08-05 01:20:57
如果是细菌发酵，镜检是很难发现的；真菌发酵还可以看到细菌污染，但类似真菌污染则很难发现。建议重复一下，或稀释后进行平板CFU检测一下。以前做过真菌发酵，起泡很厉害，结果就是污染了。...

嗯，正在重复，非常感谢！
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5楼2012-08-05 21:50:02
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419400

铁杆木虫 (正式写手)
★
gaoqian8717(金币+1): 谢谢参与
新过滤膜检查下完整性了?检查下是否染菌(从多个方面来检查),KH2PO4的影响力度好象没这么大.
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8楼2012-08-06 10:26:10
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herway

铜虫 (小有名气)
★
gaoqian8717(金币+1): 谢谢参与
磷酸盐对细胞代谢还是映像比较大的。不知道你做的是什么类的菌种。一些放线菌，磷酸盐对最终发酵培养基的粘度以及泡沫的多少有影响。
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9楼2012-08-06 17:08:27
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cao534

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你试几升的罐子，我觉得可能是其他细节你没有注意导致的，建议你好好回忆一下，起泡的原因很多，不一定是染菌
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10楼2012-08-08 11:08:47
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dxjyaojiayou

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
细菌一般在后期培养会起泡，适当的加些消泡剂来调整。染菌也有可能，各方面原因很多，仔细回忆你操作的过程。
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11楼2012-08-09 10:27:26
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liurechen

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
消泡剂最好在灭培养基的时候就加进去，这样可以减少染菌机会。另外经验上来说如果温度控制不好的话比如低温情况下也容易起泡。如果能够确认没有染菌，那么控制一下转速和通气量试试。
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12楼2012-08-09 10:59:25
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roger524

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不一定是染菌，11楼的观点我比较同意。最后菌体涨不起来就跟泡泡有关系了，泡沫太多会影响菌体生长的！！！
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13楼2012-08-09 14:03:25
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with_nothing

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你用的什么菌？罐压跟上一罐一样吗？罐压高点也利于消泡
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14楼2012-08-10 10:44:25
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strive1231236楼
2012-08-05 22:28   回复  
gaoqian8717(金币+1): 谢谢参与
guyue13147楼
2012-08-06 08:57   回复  
gaoqian8717(金币+1): 谢谢参与
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