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汕头大学海洋科学接受调剂
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beescity

至尊木虫 (著名写手)


[交流] 新手用试剂盒提取植物RNA时的一些小问题

这两天刚开始接触植物RNA提取,用的试剂盒,有些小问题不是很清楚,看看大家都是怎么处理的。
1.液氮研磨样品到什么程度?
我磨到细粉发白,中途加了5-6次液氮,每次5-6ml,很快就挥发了,基本上一直都在磨。
2.如何把样品移到离心管中?
离心管用液氮遇冷过,小勺也遇冷过,但是舀到离心管时,发现小勺进不去,不方便把细粉送进离心管,很多粘在了管口或者离心管接近管口的壁上。
3.如何界定移入的量不超过100mg?
100mg的细粉,大概有多少?我用2ml 离心管,高度大概5mm,不知道量合适不?
4.加入裂解液后涡旋,然后再加入0.5倍体积乙醇,在涡旋,有技术窍门吗?
都涡旋,还是手拿着来回摇摇就可以了。
5.匀浆移入吸附柱后会否堵住柱子?
这个问题与界定样品的量有关系,离心之后把吸附柱上都是材料残渣,会不会有影响?
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霍烨zz

银虫 (小有名气)



beescity(金币+1): 谢谢参与
跟着来学习一下~~
18楼2012-08-02 09:59:55
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查看全部 22 个回答

匿名

用户注销 (正式写手)



beescity(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
2楼2012-08-01 22:55:46
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zxd95

至尊木虫 (著名写手)


★ ★ ★ ★
beescity(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+3, 真是热心的虫虫啊 2012-08-02 15:31:54
1.液氮研磨样品到什么程度?
充分研磨,呈均匀粉状即可;
2.如何把样品移到离心管中?
直接加TriZOL,研磨均匀后,再倒入管中;或用1 ml移液枪转移。
3.如何界定移入的量不超过100mg?
取样时,可以用电子天平秤。
4.加入裂解液后涡旋,然后再加入0.5倍体积乙醇,在涡旋,有技术窍门吗?
使用振荡器即可,最短15s。
5.匀浆移入吸附柱后会否堵住柱子?
可以离心后,取上清上柱。
4楼2012-08-01 23:12:30
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beescity

至尊木虫 (著名写手)


引用回帖:
4楼: Originally posted by zxd95 at 2012-08-01 23:12:30
1.液氮研磨样品到什么程度?
充分研磨,呈均匀粉状即可;
2.如何把样品移到离心管中?
直接加TriZOL,研磨均匀后,再倒入管中;或用1 ml移液枪转移。
3.如何界定移入的量不超过100mg?
取样时,可以用电子天平 ...

对于样品取样时称重,我忘记说了,样品不是在实验室培养的,是在大自然当中生长的,取样时貌似不具备称重条件。
5楼2012-08-02 00:24:27
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简单回复
jh838111楼
2012-08-02 09:00   回复  
beescity(金币+1): 谢谢参与
假大空13楼
2012-08-02 09:17   回复  
beescity(金币+1): 谢谢参与
祝福。帮
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