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樱花淡淡

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 怎样从酸奶里提取乳酸菌DNA呀

各位大神，麻烦请教一下，怎么从酸奶样品中提取总细菌的DNA，主要是酸奶的前期处理。

谢谢各位了~

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C’est la vie

1楼2012-07-25 22:13:27

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fxh1229

铁虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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⑴ 以无菌操作吸取样品1mL加入至10mL灭菌生理盐水混合作成1：10的均匀稀释液。
⑵ 用1mL灭菌枪头吸取上述稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有10mL灭菌生理盐水的试管内，振摇试管，混合均匀。
⑶ 另取1mL灭菌吸管，按上述操作顺序，作10倍递增稀释液，至10-7。（可根据需要采用不同的量，比如500μL加入到5mL灭菌生理盐水中）
⑷ 选择10-5、10-6 、10-7三个适宜稀释度，吸取100μL至无菌培养皿中，再倒入无菌BCP培养基（含有10ppm放线菌酮）混合，每个稀释度作两个平皿。
⑹ 待平板表面干燥后，翻转平板，置30℃温箱内培养48h-72h。
先分离、提纯乳酸菌，再提取DNA