24小时热门版块排行榜    

查看: 3213  |  回复: 9

樱花淡淡

铜虫 (初入文坛)

[求助] 怎样从酸奶里提取乳酸菌DNA呀

各位大神,麻烦请教一下,怎么从酸奶样品中提取总细菌的DNA,主要是酸奶的前期处理。

谢谢各位了~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

C’est la vie
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

樱花淡淡

铜虫 (初入文坛)

我是帖子毒药吗?都米有人理我
C’est la vie
2楼2012-07-25 22:38:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sarahoak

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
樱花淡淡: 金币+10, 有帮助 2012-08-02 20:32:19
提供点实验思路吧,无菌水稀释酸奶,离心去除脂质,然后酚氯仿抽提DNA或者用试剂盒提DNA,第一步的样品稀释倍数自己设几个梯度摸下条件
3楼2012-07-26 00:57:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以先取一定量的酸奶加入到MRS液体培养基中,然后再提DNA(步骤和一般的菌一样)
4楼2012-07-26 11:04:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyz7819227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用试剂盒提取吧,先离心,然后用试剂盒提取,具体步骤试剂盒的说明书上好像有
海纳百川,有容乃大
5楼2012-07-26 16:36:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

樱花淡淡

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sarahoak at 2012-07-26 00:57:55
提供点实验思路吧,无菌水稀释酸奶,离心去除脂质,然后酚氯仿抽提DNA或者用试剂盒提DNA,第一步的样品稀释倍数自己设几个梯度摸下条件

终于有人回复我啦~
我们的酸奶样品特别特别的粘稠,里面的蛋白质成分很多。我怕稀释倍数太多了菌会很少。有没有什么好的办法解决这个问题呢~

谢谢啦
C’est la vie
6楼2012-07-26 19:01:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

樱花淡淡

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by weiyasong at 2012-07-26 11:04:21
可以先取一定量的酸奶加入到MRS液体培养基中,然后再提DNA(步骤和一般的菌一样)

主要是要研究酸奶样品中的乳酸菌多样性,怕接入到MRS里可能菌会有所损失。毕竟很多菌是不能培养的
C’est la vie
7楼2012-07-26 19:03:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

樱花淡淡

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xyz7819227 at 2012-07-26 16:36:11
用试剂盒提取吧,先离心,然后用试剂盒提取,具体步骤试剂盒的说明书上好像有

我们是用试剂盒提取的,问题是如何处理酸奶样品,怎么把酸奶里的蛋白质和菌体分离,这是个问题~
C’est la vie
8楼2012-07-26 19:04:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fxh1229

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
⑴ 以无菌操作吸取样品1mL加入至10mL灭菌生理盐水混合作成1:10的均匀稀释液。
        ⑵ 用1mL灭菌枪头吸取上述稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有10mL灭菌生理盐水的试管内,振摇试管,混合均匀。
        ⑶ 另取1mL灭菌吸管,按上述操作顺序,作10倍递增稀释液,至10-7。(可根据需要采用不同的量,比如500μL加入到5mL灭菌生理盐水中 )
        ⑷ 选择10-5、10-6 、10-7三个适宜稀释度,吸取100μL至无菌培养皿中,再倒入无菌BCP培养基(含有10ppm放线菌酮)混合,每个稀释度作两个平皿。
        ⑹ 待平板表面干燥后,翻转平板,置30℃温箱内培养48h-72h。
       先分离、提纯乳酸菌,再提取DNA
任何东西只要够深都是一把刀
9楼2012-07-26 23:24:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

独木林001

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

10楼2018-06-04 13:55:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 樱花淡淡 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +6 瞬息宇宙 2026-08-31 9/450 2026-09-02 10:25 by iaeyuan
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +17 晴天加油 2026-08-26 19/950 2026-09-02 10:07 by 奶奶的心意
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
信息提示
请填处理意见