24小时热门版块排行榜    

查看: 2990  |  回复: 11

心强我强

铜虫 (正式写手)

[求助] 用什么方法去除一个基因中的一段序列

各位虫友,刚开始做分子这块儿,不懂的很多。目的是去除一个已知基因一段已知的序列,请问采用什么方法呢,谢谢!我不知道该从哪里开始着手,请各位赐教,谢谢!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

科技

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

走过的路是平的,坚持自己所选择的。。。学会在暴雨中跳舞!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
心强我强: 金币+2, ★★★很有帮助, 非常感谢你的回复! 2012-07-22 23:13:04
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-23 15:43:41
设计一个引物,引物的前半部分和基因上半部分同源,下半部分和基因后半部分同源,然后分别PCR获得两个片段,将这两个片段再通过重叠PCR扩增获得中间片段敲除的基因。
2楼2012-07-22 22:29:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

心强我强

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by alarace at 2012-07-22 22:29:46
设计一个引物,引物的前半部分和基因上半部分同源,下半部分和基因后半部分同源,然后分别PCR获得两个片段,将这两个片段再通过重叠PCR扩增获得中间片段敲除的基因。

可不可以说的细一些呢,比如思路原理,还想请教一下先开始的一对引物得到的两个片段有什么目的?
走过的路是平的,坚持自己所选择的。。。学会在暴雨中跳舞!
3楼2012-07-22 23:22:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beer胖

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
心强我强: 金币+8, ★★★很有帮助, 谢谢!非常感谢! 2012-07-24 09:23:32
利用目的基因上下游序列作同源臂,构建基因敲除组件,转化后通过同源重组破坏目的基因。
4楼2012-07-23 16:32:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

心强我强

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by beer胖 at 2012-07-23 16:32:42
利用目的基因上下游序列作同源臂,构建基因敲除组件,转化后通过同源重组破坏目的基因。

嗯,请问有没有相关文献呢,基础不好,一头雾水呢。
走过的路是平的,坚持自己所选择的。。。学会在暴雨中跳舞!
5楼2012-07-24 09:28:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beer胖

新虫 (小有名气)

文献很多
数据库搜   overlap pcr   或融合pcr
6楼2012-07-24 16:05:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

心强我强

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by beer胖 at 2012-07-24 16:05:42
文献很多
数据库搜   overlap pcr   或融合pcr

O ,好的,谢谢!
走过的路是平的,坚持自己所选择的。。。学会在暴雨中跳舞!
7楼2012-07-25 09:19:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

脱水拂空

铜虫 (正式写手)

套叠PCR可以做的 看你目的干嘛用的

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2012-07-25 11:12:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sd3824289

木虫 (正式写手)

楼主可以去看看重叠延伸PCR,或许对你有所帮助!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

坚持,就像流星,即使知道最后的结果,也要勇敢的走到最后!
9楼2012-07-25 16:12:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

心强我强

铜虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by sd3824289 at 2012-07-25 16:12:53
楼主可以去看看重叠延伸PCR,或许对你有所帮助!

好的,灰常感谢!还想请问,通过重叠延伸PCR,得到的是粘性末端还是平末端?
走过的路是平的,坚持自己所选择的。。。学会在暴雨中跳舞!
10楼2012-07-26 12:33:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 心强我强 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-30 22:24 by xiangy672
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见