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western 中,目的蛋白没有,但是Marker 暴出来了,什么原因啊
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各位虫友: 我最近在做Western 实验,奇怪的是,目的蛋白没出来,Marker 和一些很大分子量的杂蛋白暴出来了,到底是什么原因啊? 1. 我把ECL 染液滴到二抗上,它会发光,而且有杂蛋白暴出来,说明染液和二抗也没问题吧? 2.我在转膜后,用立春红对NC膜进行了染色,条带很清晰,对转膜后的凝胶用考马斯亮蓝进行染色,条带很弱, 说明我的转膜是成功的。 3.我用1:1000的比例稀释一抗,在 4度下孵育过夜,第二天在孵育二抗,进行后续实验。 4.在滴上显色液后,MARKER 位置上会显示很亮的荧光,可其余地方没有,就让我很奇怪。 自己初学,没什么经验,希望得到大家的指导,谢谢 |
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分子生物学 |
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ankang0910
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