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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 我的DNA是坏了 还是没处理好？
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)

[求助] 我的DNA是坏了 还是没处理好？

最近实验问题百出，连刚处理的DNA都出问题了，之前一样的作法什么问题也没有的，我的DNA是两端分别修饰荧光和猝灭基团的单链DNA，发现他不和互补链杂交了，这个已经是很成熟的技术了，我不知道出了什么问题，完全没信心了，初步断定是DNA坏了，可是过了两天我再拿来，做了一下又杂交了！这是什么原因呢，真的很迷惑，到底能不能用这个DNA呢，还是要做什么处理呢，求指教啊，感激
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1楼 2012-07-18 09:27:18
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hyp862801

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你判断杂交不杂交的理由是什么啊？
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2楼2012-07-19 10:53:25
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hyp862801

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
xiong-y-x: 金币+1 2012-07-19 16:19:39
DNA也没有那么容易降解的，只要不是长期常温放置
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3楼2012-07-19 10:55:47
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hyp862801 at 2012-07-19 10:55:47
DNA也没有那么容易降解的，只要不是长期常温放置

我也觉得啊 但是杂交后的荧光强度和之前一直做的完全不一样啊 条件都没什么变化啊 不知道是怎么了
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4楼2012-07-19 16:21:11
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wy0957

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiong-y-x: 金币+1, ★有帮助 2012-07-21 09:57:34
先问问您杂交后，荧光会怎么变化，也就是你是怎么判断是否杂交上去的
你是想用荧光的变化来测定某些物质吧。
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5楼2012-07-20 17:38:16
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wy0957 at 2012-07-20 17:38:16
先问问您杂交后，荧光会怎么变化，也就是你是怎么判断是否杂交上去的
你是想用荧光的变化来测定某些物质吧。

是的啊 我带有荧光的DNA杂交后荧光强度是有增强的啊 现在的问题是我的DNA和之前的荧光值完全不一样 什么条件也没改变的，但就是杂交后荧光强度不一样了 这样的话 就没可比性了 而且减小后就没法往下做了
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6楼2012-07-21 09:57:17
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wy0957

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

按照你提供的信息，应该是杂交后荧光基团与猝灭基团拉近了，强度变小。你是ssDNA一端间荧光团，另一互补ssDNA一端接猝灭团，是这样吗？
你说的情况是不是对温度要求较高，外界温度有变化吧
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7楼2012-07-21 10:38:00
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wy0957 at 2012-07-21 10:38:00
按照你提供的信息，应该是杂交后荧光基团与猝灭基团拉近了，强度变小。你是ssDNA一端间荧光团，另一互补ssDNA一端接猝灭团，是这样吗？
你说的情况是不是对温度要求较高，外界温度有变化吧

不是你说的那种情况哦 那样的情况下 杂交荧光肯定会变弱，但我的不是，温度对杂交的影响还好吧 我试过 就是常温震荡杂交也能杂交的
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8楼2012-07-21 16:45:11
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