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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)

[求助] 我的DNA是坏了 还是没处理好?

最近实验问题百出,连刚处理的DNA都出问题了,之前一样的作法什么问题也没有的,我的DNA是两端分别修饰荧光和猝灭基团的单链DNA,发现他不和互补链杂交了,这个已经是很成熟的技术了,我不知道出了什么问题,完全没信心了,初步断定是DNA坏了,可是过了两天我再拿来,做了一下又杂交了!这是什么原因呢,真的很迷惑,到底能不能用这个DNA呢,还是要做什么处理呢,求指教啊,感激
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hyp862801

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你判断杂交不杂交的理由是什么啊?
2楼2012-07-19 10:53:25
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hyp862801

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


xiong-y-x: 金币+1 2012-07-19 16:19:39
DNA也没有那么容易降解的,只要不是长期常温放置
3楼2012-07-19 10:55:47
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hyp862801 at 2012-07-19 10:55:47
DNA也没有那么容易降解的,只要不是长期常温放置

我也觉得啊 但是杂交后的荧光强度和之前一直做的完全不一样啊 条件都没什么变化啊 不知道是怎么了
4楼2012-07-19 16:21:11
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wy0957

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiong-y-x: 金币+1, 有帮助 2012-07-21 09:57:34
先问问您杂交后,荧光会怎么变化,也就是你是怎么判断是否杂交上去的
你是想用荧光的变化来测定某些物质吧。
5楼2012-07-20 17:38:16
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wy0957 at 2012-07-20 17:38:16
先问问您杂交后,荧光会怎么变化,也就是你是怎么判断是否杂交上去的
你是想用荧光的变化来测定某些物质吧。

是的啊 我带有荧光的DNA杂交后荧光强度是有增强的啊 现在的问题是我的DNA和之前的荧光值完全不一样 什么条件也没改变的,但就是杂交后荧光强度不一样了 这样的话 就没可比性了 而且减小后就没法往下做了
6楼2012-07-21 09:57:17
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wy0957

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

按照你提供的信息,应该是杂交后荧光基团与猝灭基团拉近了,强度变小。你是ssDNA一端间荧光团,另一互补ssDNA一端接猝灭团,是这样吗?
你说的情况是不是对温度要求较高,外界温度有变化吧
7楼2012-07-21 10:38:00
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xiong-y-x

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wy0957 at 2012-07-21 10:38:00
按照你提供的信息,应该是杂交后荧光基团与猝灭基团拉近了,强度变小。你是ssDNA一端间荧光团,另一互补ssDNA一端接猝灭团,是这样吗?
你说的情况是不是对温度要求较高,外界温度有变化吧

不是你说的那种情况哦 那样的情况下 杂交荧光肯定会变弱,但我的不是,温度对杂交的影响还好吧 我试过 就是常温震荡杂交也能杂交的
8楼2012-07-21 16:45:11
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