| 查看: 1633 | 回复: 12 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
真菌DNA提取疑惑
|
||
|
提取步骤如下： 1、用提取裂解缓冲液（2%TRITON、1%SDS、100mM Tris-HCl (pH8.0), 50mM EDTA (pH8.0), 500mM NaCl）300uL悬浮菌体； 2、向Epperdofr管中加入0.5克的玻璃珠和50uL的10%SDS，在涡旋器上以其最大速率涡旋10--20min； 3、加入2倍体积即600uL的6.5M异硫氢酸胍（含50mM Tris-Cl，pH为5.8），充分混匀后，12000RPM离心3分钟 4、吸取上清加300--400uL的异丙醇，充分混匀后分两次上柱，12000RPM离心30秒； 5、70%酒精洗涤一次，12000RPM离心30秒 6、倒掉酒精后，12000RPM离心2分钟 7、加入50UL 10mM Tris，12000RPM离心45秒 8、点10UL电泳 结果：用1OD 1ML大肠杆菌来做，提的DNA浓度高，有10-20ng/uL 用1OD 1ML烟曲霉来做，却提不出任何DNA，但玻璃珠振荡裂解后，加无水乙醇直接沉淀，点电泳，却能看见亮带。（不知道为何会这样的结果） 为什么会是这样的结果呢，希望有人帮帮我。先谢了 |
回复此楼» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有235人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助——真菌DNA提取
已经有11人回复
- CTAB提取液保存了一段时间，有白色漂浮物，可以用来直接提取真菌DNA吗？
已经有3人回复
- 酿酒酵母基因组PCR出了16S的条带
已经有8人回复
- 真菌基因组DAN提取图片，求高人指点
已经有20人回复
- 丝状真菌基因组提取
已经有7人回复
- 丝状真菌提取总DNA问题
已经有14人回复
- 用真菌CTAB方法提细菌DNA可否？
已经有6人回复
- 【求助/交流】提取真菌DNA或RNA一定要液氮研磨吗？
已经有7人回复
- 【求助/交流】细菌污染对真菌提取DNA有影响么？
已经有3人回复
- 【求助/交流】在真菌基因组中PCR基因，难吗？
已经有18人回复
- 【求助/交流】真菌提取基因组DNA的方法
已经有7人回复
- 【转帖】发现首例真菌DNA病毒
已经有4人回复
- 【求助/交流】真菌的基因克隆与表达
已经有7人回复
9楼2012-07-26 09:22:08
2楼2012-07-13 16:23:31
3楼2012-07-13 17:46:51
4楼2012-07-24 10:51:13
10