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06230122

银虫 (小有名气)

[求助] 如何用地衣芽孢杆菌表达碱性蛋白酶 已有1人参与

各位大牛,请问如何用地衣芽孢杆菌表达碱性蛋白酶?
我根据菌种说明中的培养条件:NaCl 5.0g, 蛋白胨10g,牛肉膏10g,蒸馏水1L,PH7.2
配的培养基,并于30度,培养48h,之后收获上清,根据国标,于275nm检测蛋白酶的酶活,但是计算出来的酶活只有8U/ML 左右。。而别人的至少上千。这是为何?
难道是要加入诱导物才能表达吗?
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zhangyt7638

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

培养基有问题,调整碳氮比,加入速效碳源如葡萄糖和速效氮源如硫酸铵、氯化铵等,培养温度调整为34-37,看看效果
2楼2012-08-03 16:18:10
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zhuzhuaimaomao

木虫 (小有名气)

航天飞虫

【答案】应助回帖

这个培养基,加点葡萄糖,37℃,我们这里能达到10000U/ml
内首外走谓之道,意为第一次走的路,首次运用才叫道。道非重复,唯创新能生道。
3楼2015-12-28 10:46:52
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