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ice清玉

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR克隆基因，引物问题

想拿到一个基因的CD区，CD区一共1400bp，用引物A（上游引物）,B（下游引物）扩出了1-1200bp前面一段，引物C（上游引物）,D（下游引物）扩出了1000-1400bp后面一段，可是用A和D做引物PCR什么条带都没有，甚至连引物二聚体都没有...用primer5分析这对引物虽然得分不高，但也还算可以，毕竟这两个引物和别的引物一对的话还是能扩出来的...请大家帮忙分析一下原因，是否还有必要继续摸索条件用这对引物继续扩完整CD区...跪谢...TT
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1楼 2012-06-20 14:54:01
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dajiong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
A和D的Tm值差的大不大？要不要改改反应的条件试试呀？
赞一下 回复此楼
哦也
2楼2012-06-20 22:57:48
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