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PCR克隆基因,引物问题
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ice清玉
新虫
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应助: 0
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虫号: 1865213
注册: 2012-06-20
专业: 发育生物学
[
求助
]
PCR克隆基因,引物问题
想拿到一个基因的CD区,CD区一共1400bp,用引物A(上游引物),B(下游引物)扩出了1-1200bp前面一段,引物C(上游引物),D(下游引物)扩出了1000-1400bp后面一段,可是用A和D做引物PCR什么条带都没有,甚至连引物二聚体都没有...用primer5分析这对引物虽然得分不高,但也还算可以,毕竟这两个引物和别的引物一对的话还是能扩出来的...请大家帮忙分析一下原因,是否还有必要继续摸索条件用这对引物继续扩完整CD区...跪谢...TT
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1楼
2012-06-20 14:54:01
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dajiong
金虫
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虫号: 1615753
注册: 2012-02-13
性别: GG
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
A和D的Tm值差的大不大?要不要改改反应的条件试试呀?
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一下
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哦也
2楼
2012-06-20 22:57:48
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