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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 考马斯亮蓝法
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hncuwz

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 考马斯亮蓝法 已有2人参与

各位，我用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的时候，书上讲的是595nm出现吸收峰，而我用紫外扫描并未出现了，这个是紫外的原因还是，还有初始牛血清蛋白的浓度为0的时候，测得的值为0.591，这个正常不呢，谢谢了啊！
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pigment
1楼 2012-06-18 10:29:53
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xunmeng1985

铁杆木虫 (著名写手)
★
hsd3521: 金币+1, 感谢耐心应助 2012-06-19 20:09:15
引用回帖:
4楼: Originally posted by hncuwz at 2012-06-18 20:49:03
CCB是什么意思呢，仪器是预热的了，比色皿也是干净的了，我估计是仪器问题了，我们使用的是日立的U3900H

就是考马斯亮蓝G250 溶液，也就是你做标准曲线是配置的标准染色剂溶液！
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踏雪寻梅，百花深处！
5楼2012-06-19 11:15:19
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
树树8013: 金币+1, 谢谢hsd斑回帖交流。 2012-06-19 10:39:44
首先 浓度为0的时候 考马斯亮蓝样为0.591 偏高 可以考虑是否CBB配置有问题
其次 对于无峰的情况 可以考虑添加量的问题 是否存在待测蛋白未被CBB充分结合或者CBB量过大造成主显色
挨个排除吧 总之是出现问题了
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太胖了！~
2楼2012-06-18 10:51:22
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xunmeng1985

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
树树8013: 金币+1, 谢谢回帖交流，欢迎常来咱们自己的食品板块。 2012-06-19 10:40:09
595nm已是可见的范围，最好用可见；初始蛋白质浓度为0，而其所测值不是0 ，这说明仪器有问题，可能没预热或者比色皿不干净！
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踏雪寻梅，百花深处！
3楼2012-06-18 13:50:12
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hncuwz

铁杆木虫 (正式写手)
树树8013: 如果想与哪位回帖者交流，点击右下角“引用回复”，这样他才能收到相关信息。 2012-06-19 10:42:02
CCB是什么意思呢，仪器是预热的了，比色皿也是干净的了，我估计是仪器问题了，我们使用的是日立的U3900H
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pigment
4楼2012-06-18 20:49:03
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