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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » His标签的蛋白纯化柱子
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yeshui

铁虫 (小有名气)

[求助] His标签的蛋白纯化柱子

每次纯化，我都会把柱子里的填料重悬起来，这样会对填料有什么不好的影响吗？还有就是填柱子后胶里面有气泡，会对纯化有影响吗？谢谢哦
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1楼 2012-06-13 19:47:12
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zhouyunbo

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-13 15:04:32
yeshui: 金币+1, ★有帮助 2012-08-13 20:56:53
yeshui: 回帖置顶 2012-08-13 20:58:12
每次装柱子都会对填料产生一定伤害，毕竟每颗填料里都有无数的小孔，每次装柱都会产生一定的挤压，填料会变形。                                          气泡对柱效的伤害特别大，需要尽量减少。         为什么每次都有重悬，柱子用20%的乙醇可以保存很久，保存半年再用都没问题。
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要舍得
6楼2012-08-13 13:38:45
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zhouyunbo

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yeshui at 2012-08-13 20:56:29
感觉那样的话蛋白与填料可以更好的结合的...

想更好的结合就在每次使用前做一次CIP，不同的填料可能会使用不同的清洗液做在线清洗，一般用0.1M的NaOH流20~30分钟然后水洗。用什么清洗液网上都可以查到
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要舍得
9楼2012-08-14 10:50:45
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zhouyunbo

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yeshui at 2012-08-13 20:56:29
感觉那样的话蛋白与填料可以更好的结合的...

你每次装的柱效都会不同，有好有坏，如果进行工艺摸索又会增加一个变量。想更好的结合，可以将填料压的紧一点、均匀一点。在柱子和填料可承受的范围内使用高压、均匀的流速，这样柱效会更高！
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yeshui
要舍得
10楼2012-08-14 10:58:10
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