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巢氏PCR引物如何设计?
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uuu555000
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巢氏PCR引物如何设计?
如题,巢氏PCR引物如何设计
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1楼
2012-06-12 17:25:08
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西瓜
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2012-06-12 19:13:04
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5楼
:
Originally posted by
uuu555000
at 2012-06-12 18:49:40
第一次的PCR产物不稀释能直接作为第2轮的模板?...
可以的,就是要这么做
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6楼
2012-06-12 19:01:03
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2012-06-12 18:17:55
uuu555000: 金币+1
2012-06-12 18:21:38
巢式PCR就是2轮PCR,第二次PCR以第一次PCR的产物为模板。第二对引物设计上比第一对里面更靠里,就是说第二次PCR的产物比第一次的产物要短一些。至于短多少,至少两端各往里几个bp。其他就和普通PCR没什么特别的啦。
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2楼
2012-06-12 17:53:17
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2楼
:
Originally posted by
西瓜
at 2012-06-12 17:53:17
巢式PCR就是2轮PCR,第二次PCR以第一次PCR的产物为模板。第二对引物设计上比第一对里面更靠里,就是说第二次PCR的产物比第一次的产物要短一些。至于短多少,至少两端各往里几个bp。其他就和普通PCR没什么特别的啦。
还能第一次PCR产物,第一次的引物,还能pcr?
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3楼
2012-06-12 18:21:30
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2012-06-13 13:36:34
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3楼
:
Originally posted by
uuu555000
at 2012-06-12 18:21:30
还能第一次PCR产物,第一次的引物,还能pcr?...
第一次的引物再用,效果不好,酶需要一些额外片段来结合在模板上,所以第二对引物要靠里。引物不同,能增加特异性,这也是巢式PCR的意义所在啦。你可以百度一下原理,看到图片会更好理解哈
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4楼
2012-06-12 18:24:09
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