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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » （求助）蛋白质双向电泳胶显色后怎么会跑成这个样子。。。
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pangzikh

新虫 (初入文坛)

[交流] （求助）蛋白质双向电泳胶显色后怎么会跑成这个样子。。。

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求各路大神帮忙看下我的蛋白质双向电泳胶显色后怎么会跑成这个样子？是胶配的有问题吗？还是其他问题，求分析，谢谢~~~
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1楼 2012-06-07 18:41:24
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lzh860801

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by pangzikh at 2012-06-11 12:17:10
是银染胶也是18cm大胶，这个样品是鸭血清蛋白，已经用试剂盒去过高丰度了，预实验跑的7cm小胶效果相当好，点也很多。除非我上错样品，否则不应该跑成这样，有没有可能是胶配的有问题 ，我一直怀疑是配胶的时候SDS加 ...

电泳液以及电流电压是否有问题我不清楚，因为没遇到过这种情况，你也没给出你的实验条件，只遇到过电泳液脏的话胶面就很难看，
但是SDS加的量不对这一点应该是不会影响的，实际上跑蛋白的时候只要样品里有SDS ，胶里面有没有差别不大。
再就是LZ的样品放了多久，是否反复冻融，这些都可能影响样品质量。
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8楼2012-06-12 09:05:33
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秋日@恋歌

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得不是你染色的问题 而是配胶和点样的问题
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pangzikh
2楼2012-06-08 03:10:52
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439864925

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
pangzikh: 金币+3, 盐离子含量高，一般跑出来的二向应该是有拖尾和横纹吧 2012-06-11 12:04:41
marker是没问题的.可能是样品中盐离子含量过高
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3楼2012-06-08 07:10:17
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pangzikh

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
pangzikh: 回帖置顶 2012-06-08 09:47:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by 秋日@恋歌 at 2012-06-08 03:10:52
我觉得不是你染色的问题 而是配胶和点样的问题

染色应该没问题，蛋白跑成什么样子，染色就染成什么样子。顶多就是染色深浅和背景颜色。所以说还是蛋白跑的有问题，你看maker都跑歪了。关于点样，我用的是胶条跑的是双向。等电聚焦有没有问题不好说，但二向肯定有问题，要么是胶配的有问题，要么是电泳过程有问题，还有一种可能是胶条和胶面结合不紧密。
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4楼2012-06-08 09:09:47
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