24小时热门版块排行榜    

查看: 2427  |  回复: 11

szp0401

木虫 (正式写手)

[求助] 磁珠 生物素 PCR 已有1人参与

引物用生物素修饰了 可以吸附到磁珠上面,但PCR之后的PCR产物却吸不到上面或者说吸附量很小,为什么
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yingyangyang

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
西瓜: 金币+3, 鼓励热心交流~直接“快速回复主题”是没有传图片的功能,需点击“回复帖子”,在新的页面里就有传图片、附件的功能了。 2012-05-31 09:32:11
你做的是文库构建吗?  是不是RNa-Seq?     我有这个过程图,但是这里发不了图片给你看!  只能文字描述下,但是怕描述不清楚呢!
带生物素的引物与DNA片段一端连接,加5’端接头与DNA片段的另一端连接,然后反转录,带生物素的引物开始按照DNA模板延伸;然后PCR以带生物素的cDAN为模板扩增出来的片段不会带有生物素。
2楼2012-05-30 22:08:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

szp0401

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yingyangyang at 2012-05-30 22:08:41
你做的是文库构建吗?  是不是RNa-Seq?     我有这个过程图,但是这里发不了图片给你看!  只能文字描述下,但是怕描述不清楚呢!
带生物素的引物与DNA片段一端连接,加5’端接头与DNA片段的另一端连接,然后反转录 ...

谢谢你,我不是构建文库,我只制备单链DNA
3楼2012-05-31 18:08:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

szp0401

木虫 (正式写手)

怎么没人回复啊
4楼2012-06-09 17:22:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

磁珠是什么磁珠?
PCR过程有高温变性,生物素与磁珠之前的吸附已经被破坏了吧
伟大航线....
5楼2012-06-09 23:48:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

szp0401

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by longrna at 2012-06-09 23:48:42
磁珠是什么磁珠?
PCR过程有高温变性,生物素与磁珠之前的吸附已经被破坏了吧

磁珠是promage的磁珠,生物素与磁珠之间的吸附是在PCR之后
6楼2012-06-11 12:07:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by szp0401 at 2012-06-11 12:07:49
磁珠是promage的磁珠,生物素与磁珠之间的吸附是在PCR之后...

即生物素是跟随PCR反应的,磁珠没有是吧?
但是生物素(引物)经过了PCR后其性质是否已改变,由原来的能跟磁珠吸附变成不成吸附呢?不懂....
伟大航线....
7楼2012-06-12 11:45:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

szp0401

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by longrna at 2012-06-12 11:45:24
即生物素是跟随PCR反应的,磁珠没有是吧?
但是生物素(引物)经过了PCR后其性质是否已改变,由原来的能跟磁珠吸附变成不成吸附呢?不懂.......

这个不会,如果性质会发生改变的话,那引物的生物素修饰岂不是没什么作用,而且有多篇文献都是采用引物生物素修饰的方法
8楼2012-06-12 13:22:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gungunak47

铁虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

可以试试 惠尔纳米科技有限公司的磁珠  我们用过的  效果比PROMEGA好很多
9楼2012-06-13 17:05:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

szp0401

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by gungunak47 at 2012-06-13 17:05:59
可以试试 惠尔纳米科技有限公司的磁珠  我们用过的  效果比PROMEGA好很多

谢谢  应该不是磁珠的问题
10楼2012-06-14 12:24:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 szp0401 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 情人节自我反思:在爱情中有过遗憾吗? +5 瞬息宇宙 2026-02-15 6/300 2026-02-18 12:51 by 月下雪林
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:38 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[考研] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:38 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:08 by lotyj5cz79
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 3/150 2026-02-18 06:53 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错,点赞! +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题,请指教! 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
请填处理意见